。ㄈ)免疫測定
利用抗原抗體反應的原理,制備出抗細胞因子的單克隆抗體或多克隆抗體,可進行細胞因子的免疫檢測。這種方法的優(yōu)點是特異性強、操作簡便,缺點是靈敏度不夠,且不能代表活性測定的結果。從目前的國際發(fā)展趨勢來看,已研制出了高靈敏度、特異性高、高度配套的細胞檢測試劑盒,其應用范圍正在擴大,有良好的發(fā)展前景。
。ㄋ)功能測定與抗體抑制
為解決功能定特異性不夠,免疫測定靈敏度不夠的問題,可將兩種方法結合起來,利用各自的長處,有可能得到較為可靠的結果。在這一方法中,所用的抗細胞因子抗體必須是具有中和活性的抗體。
(五)分子雜交技術
利用分子生物學技術,制備出細胞因子的基因探針,可通過分子雜交技術檢測細胞內(nèi)細胞因子mRNA的表達,這是一種高度敏感和高度特異的檢測技術,目前在實驗室研究中使用較廣,其缺點是操作較為繁瑣,測定結果只能代表細胞因子基因的表達,而不能代表活性細胞因子的水平。
(六)多聚酶鏈反應技術(PCR)
PCR(polymerase chain reation)技術是一種高效的基因體外擴增技術,目前PCR技術已用于細胞因子的檢測中,首先將細胞因子產(chǎn)生細胞的RNA提取出來,再經(jīng)逆轉錄合成cDNA,以cDNA為模板,在細胞因子引物的引導下,即可進行PCR擴增。這種技術是迄今最敏感的細胞因子檢測技術,操作也較簡便,缺點與分子雜交技術類似,并且不容易對細胞因子表達水平進行定量。