實習二十三 肝臟功能檢查
一、目的要求
（一)了解膽紅素代謝功能試驗，血清蛋白質(zhì)測定，血清蛋白電球。血清轉(zhuǎn)氨酶測定的基本原理。
(二)掌握阻塞性黃疽、肝細胞性黃疽及溶血性黃疽的實驗室區(qū)別。
(三)掌握常用肝功能檢查正常值臨床意義和選用原則。
二、見習方法
(一)輔導(dǎo)教師講解重點及注意事項。
(二)學生按實習指導(dǎo)要求進行尿膽紅素、尿膽原，血清膽紅素測定。
(payment-defi.com/jianyan/三)討論、總結(jié)。
三、見習用具
白工作衣自備，其它用具由實驗室準備。
四、見習內(nèi)容
(一)尿膽紅素試驗Harrison法
原理：
用氯化鋇吸附尿液中膽紅素后，滴加酸性三氯化鐵試劑，使膽紅素氧化成膽綠素而呈綠色反應(yīng)。
試劑：
l、Fouchet試劑——酸性三氯化鐵試劑
稱取三氯乙酸25g，加蒸餾水少許溶解，再加入三氯化鐵0.9g，溶解后加蒸餾水至lOOml。
2、100g／L氯化鋇溶液：
操作：
1、取尿液約payment-defi.com/rencai/5ml，加100g/L氯化鋇溶液3～5滴，此時出現(xiàn)白色沉淀物。
2、將上述渾濁尿離心后，棄去上清液，留離心沉淀物在管底，加入Fouchet試劑九滴，輕輕彈動試管。呈綠、藍色反應(yīng)者為陽性，否則為陰性。
尿膽紅素試驗試紙法：
原理、操作、結(jié)果判斷(參閱“目測八聯(lián)試紙法”)
(二)尿膽原定性檢查
1、原理
尿膽原在酸性溶液中可和Ehrlich氏醛試劑中的對二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反應(yīng)而形成櫻桃紅色化合物。
2、用具和試劑
Ehrlich醛試劑，5毫升吸管1支，10毫升小試管3支，蒸餾水。
3、操作方法：
(1)取3支小試管，編成1：10、1：20、1：40。
(2)第一管放蒸餾水4.5毫升，以下每管放蒸餾水2毫升。
(3)第一管放入被檢小便0.5毫升，吸吹3次混勻，吸出3毫升，放2豪升入第二管，余1毫升棄去，在第二管吸吹3次，吸2毫升于第三管，吸吹3次，棄去2毫升。
(4)每管加Ehrlich試劑4滴，然后自管口向下觀察，以最高稀釋度的一管仍呈陽性反應(yīng)者為終點管并記錄之。(如陰性，記錄最濃一管，如陽性則記錄最稀一管)。
4、正常值及臨床意義
正常值：正常情況下，每24小時由尿排出的尿膽原少于3.5mg/L，一般定性試驗呈弱陽性反應(yīng)，其陽性稀釋廈應(yīng)在1：20以下。
臨床意義
①肝細胞性黃疸時，由于受損細胞不能將從腸道重吸收的尿膽原充分氧化為膽紅素再排入腸道，因而經(jīng)體循環(huán)由尿排出的尿膽原增多。在急性肝炎病人有時其他試驗尚屬正常時，尿中尿膽原含量即已增多，因此，它是一個較為敏感的肝功能試驗。病毒性肝炎的早期尿膽原增高，在黃疽的極期，可因膽紅素排入腸道的量減少，而使尿中尿膽原減少。
②溶血性黃疸時，膽紅素形成增多，由腸道吸收的尿膽原亦隨之增多，故尿中尿膽原增高。溶血引起肝細胞功能損傷時，也能引起尿中尿膽原增多。
③阻塞性黃疸時，尿中尿膽原可消失，如連續(xù)數(shù)天尿中無尿膽原，提示可能是由于惡性腫瘤引起了膽道完全阻塞。膽石引起的阻塞性黃疸呈間歇性的尿膽原消失或減少。
④肝硬變及中毒引起的肝損害，尿膽原試驗常為陽性。
(二)試紙法
原理、操作、結(jié)果判斷，參閱“目測八聯(lián)試紙法”
三、尿膽素檢驗
尿膽素的臨床意義與尿膽原同。
肝功能檢查
血清總膽素和直接膽紅素測定
化驗原理
Bilirubin(Direct)+Diazotized →sulfanic acid Azobilirubin
Bilirubin(Total)+Diazotized sulfanic Acid Azobilirubin
Azobilirubin在540nm波長有特定吸收峰
試劑
1、鹽酸試液：HCL0.1N·1×240ml
2、咖啡因試液(Caffeine Reagent)：Caffeine 0.128mole／L·1×240ml
3、苯磺酸試劑：sulfanic acid7.1mmole／L·8×15ml
4、亞硝酸鈉試劑：sodium nitrite 25 mmole／L·1× lOml
5、膽紅素標準液：Biliurbin 10mg／dl(171 umole／L)·2ml
檢驗注意事項
1、采取新鮮未溶血之血清。
2、室溫下須于2小時內(nèi)完成化驗。
3、2～5℃下亦須于12小時內(nèi)完成化驗。
化驗方法
取1.25ml亞硝酸鈉試液加人苯礴酸試液配成偶氮試液，可穩(wěn)定7天(2-8℃蔽光下)
溫度：25or30℃
| 空白對照 | 標準液 | 總膽紅素 | 直接膽紅素 | |
| 咖啡因試液 | 0.8ml | 0.8ml | 0.8ml | - |
| 鹽酸試液 | - | - | - | 0.8ml |
| 蒸 餾 水 | 0.04ml | - | - | - |
| 標 準 液 | - | 0.4ml | - | - |
| 血 液 | - | - | 0.04ml | 0.04ml |
| 混勻后加入下列試驗 | ||||
| 偶氮試劑 | 0.2ml | 0.2ml | 0.2ml | 0.2ml |
| 混勻反應(yīng)5min，在540nm波長下以空白對照組歸零后測其吸光值 |
※測直膽紅素時，空白對照要以鹽酸試劑代替咖啡因試劑。
計算
Factor=標準液濃度（171)
標準液吸光值
總膽紅素=總膽紅素吸光值×Factor
直接膽紅素=直接膽紅素吸光值×Factor
間接膽紅素=總膽紅素-直接膽紅素
正常值
成人總膽紅素：0.3～1.2mg/dl(5.13～20.52umole/l)
直接膽紅素：<0.2mg/dl(3.42umole/l)
間接膽紅素：0.2～0.7mg/dl(3.42～11.97umole/l)
適用范圍
線性界限：20mg/dl(342umole/l)
總膽紅素若超過20mg/dl(342umole/l)時，需以生理鹽水稀釋后再測試，結(jié)果再
乘稀釋倍數(shù)。
