臨床免疫學及檢驗授課教案-理論課教案:單克隆抗體

課程名稱

臨床免疫學檢驗

授課題目（章節(jié)或主題)

單克隆抗體與基因工程抗體

授課教師

徐霞

所屬二級學院

第一臨床學院

所屬教研室

臨床免疫學檢驗

職稱

主任技師、副教授

授課時間

2006 年 9月11 日第 2周星期 2 第4-5 節(jié)第   次課

授課時數(shù)

2   學時

授課班級

醫(yī)學檢驗 專業(yè)（本科√□ 專科□)  2003 級I、II、III 班

教學課型

理論課√□ 實驗課□ 習題課□ 討論課□ 實習（踐)課□  其它□

教材名稱、作者、出版社及出版時間

臨床免疫學檢驗 呂世靜 中國醫(yī)藥科技出版社2004年8月

教學目標與要求：

1．掌握單克隆抗體的概念、與多克隆抗體的異同點

2．掌握雜交瘤技術(shù)的基本原理、單克隆抗體的制備流程及單克隆抗體的臨床應(yīng)用

3．熟悉細胞DNA合成的途徑、HAT培養(yǎng)基的選擇原理

4．熟悉細胞融合、陽性克隆的篩選及克隆化的方法

5．熟悉腹水單克隆抗體的制備及純化

6．了解基因工程抗體的概念及特點

主要知識點、重點與難點：

知識點：復習抗體的概念、結(jié)構(gòu)、種類，在多克隆抗體知識的基礎(chǔ)上講解單克隆抗體的概念

重點：單克隆抗體的概念、特點，雜交瘤技術(shù)的基本原理，單克隆抗體的制備流程及臨床應(yīng)用

難點：HAT培養(yǎng)基的選擇原理

教學方法（請打√選擇)：

講授法√□　 討論法□ 　演示法□　 自學輔導法□　 　練習法(習題或操作) 　讀書指導法□

ＰＢＬ（以問題為中心的教學法)√□　　案例法□　 其他□

教學媒體（請打√選擇)：

教材□ 板書√□ 實物□  標本□  掛圖□ 模型□ 投影□ 幻燈□   錄像□   CAI（計算機輔助教學)√□

教學過程設(shè)計（包括講授內(nèi)容、講授方法、時間分配payment-defi.com、媒體選用、板書設(shè)計等)：

講授內(nèi)容：

雜交瘤技術(shù)的基本原理：雜交瘤細胞的特點、細胞融合技術(shù)、常用的骨髓瘤細胞株（NS1、SP2/0)、細胞融合劑、細胞DNA合成途徑、選擇培養(yǎng)基的成分及作用 30分鐘

單克隆抗體的制備流程：親本細胞的選擇和制備、細胞融合、雜交瘤細胞的篩選和克隆化、單抗的制備和純化 30分鐘

基因工程抗體的概念及現(xiàn)狀  10分鐘

小結(jié)：單克隆抗體的特性及臨床應(yīng)用價值  10分鐘

講授方法：

在復習抗體的概念、結(jié)構(gòu)、種類及多克隆抗體知識的基礎(chǔ)上講解單克隆抗體的概念。重點內(nèi)容由老師講解，相關(guān)基礎(chǔ)免疫知識以提問的方式引導學生回答，再由教師補充。

采用多媒體課件、配合板書

提問、課堂討論等師生互動的設(shè)計：

1．  免疫小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合后會出現(xiàn)幾種組合形式的細胞？最終能在HAT培養(yǎng)基中存活下來的是何細胞？為什么？

2．  融合后陽性克隆的篩選（分泌專一抗體)方法？提示用間接ELISA法，請同學自行設(shè)計。

教學小結(jié)、復習思考及作業(yè)題布置：

小結(jié)：傳統(tǒng)方法制備的免疫血清為多克隆抗體，其特異性不高、交叉反應(yīng)多、來源有限。單克隆抗體是只識別單一抗原表位的B淋巴細胞克隆產(chǎn)生的同源抗體。其理化性質(zhì)高度均一、效價高、只與一種抗原表位發(fā)生反應(yīng)、生物活性單一、具有高度特異性又易于大量生產(chǎn)，因此其作為一種有效的生物制品被廣泛應(yīng)用于生命科學的各個領(lǐng)域，尤其在疾病的診斷治療方面顯示出極大的應(yīng)用價值。單克隆抗體是應(yīng)用B細胞雜交瘤技術(shù)進行制備的。是在細胞融合的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。這種雜交瘤細胞具有兩種親本細胞的特性，即既能夠分泌抗體又能在體外長期繁殖，經(jīng)過克隆化后成為單個細胞克隆，分泌的抗體即為單克隆抗體�；�因工程抗體是指應(yīng)用DNA重組及蛋白工程技術(shù)對編碼抗體的基因按不同的需要進行改造和裝配，經(jīng)導入適當?shù)氖荏w細胞后重新表達的抗體，包括人源化抗體、小分子抗體、雙特異性抗體和抗體融合蛋白等。

教學中的創(chuàng)新點（加強基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、外語運用、啟發(fā)學生思維、指導學生自學、介紹學科新進展等方面)：

1．加強基礎(chǔ)與臨床的聯(lián)系：

在介紹單抗制備流程時，以臨床上急性心梗的特異性標志物—肌鈣蛋白I的檢測為例，要求學生跟著老師“如何制備抗肌鈣蛋白I單克隆抗體” 的問題同步思維，以此主線串出單抗制備流程。

2．加強相關(guān)學科的聯(lián)系

   在介紹HAT選擇培養(yǎng)基時，從細胞的DNA合成途徑（生化知識)來講解HAT選擇培養(yǎng)基的三種關(guān)鍵成分及其為什么能起到選擇作用？

3．小結(jié)時以動畫的形式生動的再現(xiàn)單克隆抗體和多克隆抗體的制備流程及其設(shè)計的關(guān)鍵知識點。

參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等)：

醫(yī)學免疫學  龔非力主編（科學出版社2003年1月)

臨床免疫學和免疫檢驗  王蘭蘭主編（人民衛(wèi)生出版社2003年2月)

Roitt IM,Delves PJ,Roitt’s Essential Immunology Tenth Edition Blackwell Publishing Oxford.2001

教研室

意 見

教研室主任簽章： 年　　月　　日

教學后記（即教學實施情況總結(jié)分析，在課程結(jié)束后填寫)

整堂課以“為什么要使用單抗”為主要問題，從•一個抗原分子可能含有許多抗原決定基•一個B細胞只會生產(chǎn)一種抗體•傳統(tǒng)抗血清對相似抗原會有交叉反應(yīng)性•B細胞無法在培養(yǎng)基中生長•腫瘤細胞可在培養(yǎng)基中永久生長

•利用細胞融合法可結(jié)合兩種特性等要點層層展開，配合板書和簡要的提綱、圖片、動畫，使學生始終能跟隨老師同步思維，感覺不錯。學生也表示，老師的問題一個跟一個，很吸引同學們的注意力，想開小差都開不了。