一、填空題 1.核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是 。 2.20世紀(jì)50年代,Chargaff等人發(fā)現(xiàn)各種生物體DNA堿基組成有 的特異性,而沒(méi)有 的特異性 3.DNA雙螺旋中只存www.med126.com在 種不同堿基對(duì)。T總是與 配對(duì),C總是與 配對(duì)。 4.核酸的主要組成是 , 和 。 5.兩類核酸在細(xì)胞中的分布不同,DNA主要位于 中,RNA主要位于 中。 6.核酸分子中的糖苷鍵均為 型糖苷鍵。糖環(huán)與堿基之間的連鍵為 鍵。核苷與核苷之間通過(guò) 鍵連接形成多聚體。 7.嘌呤核苷有順式,反式二種可能,但天然核苷多為 。 8.X射線衍射證明,核苷中 與 平面相互垂直。 9.核酸在260nm附近有強(qiáng)吸收,這是由于 。 10.給動(dòng)物食用3H標(biāo)記的 ,可使DNA帶有放射性,而RNA不帶放射性。 11.雙鏈DNA中若 含量多,則Tm值高。 12.雙鏈DNA熱變性后,或在pH2以下,或pH12以下時(shí),其OD260 ,同樣條件下,單鏈DNA的OD260 。 13.DNA樣品的均一性愈高,其熔解過(guò)程的溫度范圍愈 。 14.DNA所處介質(zhì)的離子強(qiáng)度越低,其熔解過(guò)程的溫度范圍越 ,溶解溫度越 ,所以DNA應(yīng)保存在較 濃度的鹽溶液中,通常為 mol/L的NaCl溶液。 15.DNA分子中存在于三類核苷酸序列:高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列和單一序列。tRNA,rRNA以及組蛋白等由 編碼,而大多數(shù)蛋白質(zhì)由 編碼。 16.硝酸纖維素膜可結(jié)合 鏈核酸。將RNA變性后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上再進(jìn)行雜交,稱 印跡法。 17.變性DNA的復(fù)性與許多因素有關(guān),包括 , , , , 等。 18.DNA復(fù)性過(guò)程符合二級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué),其Cot1/2值與DNA的復(fù)雜程度成 比。 19.雙鏈DNA螺距為3.4nm,每匝螺旋的堿基數(shù)為10,這是 型DNA的結(jié)構(gòu)。 20.RNA分子的雙螺旋區(qū)以及RNA-DNA雜交雙鏈具有與 型DNA相似的結(jié)構(gòu),外形較為 。 21.NAD+,F(xiàn)AD和CoA都是 的衍生物。 22.維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是 ,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如 , 和 也起一定作用。 23.tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)為 形,其一端為 ,另一端為 。 24.測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的方法主要有Sanger提出的 法和Maxam,Gilbert提出的 法。 25.引起核酸變性的因素很多,如 , 和 等。 26.Oligo(dT)-纖維素可以用來(lái)分離純化真核生物的 。 二、是非題 1.脫氧核糖核苷中的糖環(huán)3′位沒(méi)有羥基。 2.若雙鏈DNA中的一條鏈堿基順序?yàn)閜CpTpGpGpApC,則另一條鏈的堿基順序?yàn)閜GpApCpCpTpG。 3.若種屬A的DNA Tm值低于種屬B,則種屬A的DNA比種屬B含有更多的A-T堿基對(duì)。 4.原核生物和真核生物的染色體均為DNA與組蛋白的復(fù)合體。 5.核酸的紫外吸收與溶液的pH值無(wú)關(guān)。 6.生物體內(nèi)存在的游離核苷酸多為5′-核苷酸。 7.Z型DNA與B型DNA可以相互轉(zhuǎn)變。 8.生物體內(nèi),天然存在的DNA分子多為負(fù)超螺旋。 9.真核細(xì)胞染色體DNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)之一是具有重復(fù)序列,高度重復(fù)序列一般位于著絲點(diǎn)附近,通常不轉(zhuǎn)錄。 10.mRNA是細(xì)胞內(nèi)種類最多、含量最豐富的RNA。 11.tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)中的額外環(huán)是tRNA分類的重要指標(biāo)。 12.真核生物成熟mRNA的兩端均帶有游離的3′-OH。 13.目前為止發(fā)現(xiàn)的修飾核苷酸大多存在于tRNA中。 14.對(duì)于提純的DNA樣品,測(cè)得OD260/OD280<1.8,則說(shuō)明樣品中含有RNA。 15.核酸變性或降解時(shí),出現(xiàn)減色效應(yīng)。 16.DNA樣品A與B分別與樣品C進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn),得到的雜交雙鏈結(jié)構(gòu)如下圖: 那么說(shuō)明樣品A與C的同源性比樣品B與C的同源性高。 17.基因表達(dá)最終產(chǎn)物都是蛋白質(zhì)。 18.核糖體不僅存在于細(xì)胞質(zhì)中,也存在于線粒體和葉綠體中。 三、選擇題(下列各題均有五個(gè)備選答案,其中只有一個(gè)正確答案) 1.下列突變中,哪一種致死性最大?( ) (A)胞嘧啶取代腺嘌呤 (B)沉降系數(shù)下降 (C)插入三個(gè)核苷酸 (D)插入一個(gè)核苷酸 (E)丟失三個(gè)核苷酸 2.雙鏈DNA熱變后( ) (A)黏度下降 (B)沉降系數(shù)下降 (C)浮力密度下降 (D)紫外吸收下降 (E)都不對(duì) 3.下列復(fù)合物中除哪個(gè)外,均是核酸與蛋白質(zhì)組成的復(fù)合物( ) (A)核糖體 (B)病毒 (C)端粒酶 (D)RNase P (E)核酶(ribozyme) 4.艾滋病病毒HIV是一種什么病毒( ) (A)雙鏈DNA病毒 (B)單鏈DNA病毒 (C)雙鏈RNA病毒 (D)單鏈RNA病毒 (E)不清楚 5.RNA經(jīng)NaOH水解,其產(chǎn)物是( ) (A) 5′-核苷酸 (B)2′-核苷酸 (B) 3′-核苷酸 (D)2′-核苷酸和3′-核苷酸的混合物 (E)2′-核苷酸、3′-核苷酸和5′-核苷酸混合物 6.反密碼子UGA所識(shí)別的密碼子是( ) (A)ACU (B)ACT (C)UCA (D)TCA (E)都不對(duì) 7.對(duì)DNA片段作物理圖譜分析,需要用( ) (A)核酸外切酶 (B)DNase I (C)DNA連接酶 (D)DNA聚合酶I (E)限制性內(nèi)切酶 四、思考問(wèn)答題 1.(1)T7噬菌體DNA,其雙螺旋鏈的相對(duì)分子質(zhì)量為2.5×107。計(jì)算DNA鏈的長(zhǎng)度(設(shè)核苷酸對(duì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量為650) (2)相對(duì)分子質(zhì)量為130×106的病毒DNA分子,每微米的質(zhì)量是多少? (3)編碼88個(gè)核苷酸和tRNA的基因有多長(zhǎng)? (4)編碼細(xì)胞色素C(104個(gè)氨基酸)的基因有多長(zhǎng)?(不考慮起始和終止序列) (5)編碼相對(duì)分子質(zhì)量為9.6萬(wàn)的蛋白質(zhì)的mRNA,相對(duì)分子質(zhì)量為多少?(設(shè)每個(gè)氨基酸的平均相對(duì)分子質(zhì)量為120) (6)λ噬菌體DNA長(zhǎng)17μm,一突變體DNA長(zhǎng)15μm,問(wèn)該突變體缺失了多少堿基對(duì)? 2.對(duì)一雙鏈DNA而言,若一條鏈中(A+G)/(T+C)=0.7,則(1)互補(bǔ)鏈中(A+G)/(T+C)=?(2)在整個(gè)DNA分子中(A+G)/(T+C)=?(3)若一條鏈中(A+T)/(G+C)=0.7,則互補(bǔ)鏈中(A+T)/(G+C)=?(4)在整個(gè)DNA分子中(A+T)/(G+C)=? 3.試述三種主要的RNA的生物功能(與蛋白質(zhì)生物合成的關(guān)系)。 4.Hershey-Chase所做的噬菌體轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中,為什么32P只標(biāo)記在DNA分子中,而35S只標(biāo)記在蛋白質(zhì)的外殼上?如果用35S標(biāo)記的噬菌體去感染細(xì)菌,那么在子代病毒中是否會(huì)出現(xiàn)帶35S標(biāo)記的病毒?如果是用32P標(biāo)記的噬菌體重復(fù)實(shí)驗(yàn),那么在子代病毒中是否可以找到帶32P標(biāo)記的病毒? 5.某雙鏈DNA樣品,含28.9摩爾百分比的腺嘌呤,那么T,G,C的摩爾百分比分別為多少? 6.試述下列因素如何影響DNA的復(fù)性過(guò)程。 (1)陽(yáng)離子的存在 (2)低于Tm的溫度 (3)高濃度的DNA鏈 7.用稀酸或高鹽溶液處理染色質(zhì),可以使組蛋白與DNA解離,請(qǐng)解釋。 8.線粒體電子轉(zhuǎn)移鏈中的一種重要蛋白質(zhì):酵母細(xì)胞色素氧化酶由7個(gè)亞基組成,但是只有其中的4種亞基的氨基酸順序由酵母核內(nèi)DNA編碼,那么其余三種亞基的氨基酸順序所需的信息來(lái)自何處? 9.胰脫氧核糖核酸酶(DNase I)可以隨機(jī)地水解溶液中的DNA的磷酸二酯鍵,但是DNase I作用于染色體DNA只能使之有限水解,產(chǎn)生的DNA片段長(zhǎng)度均為200bp倍數(shù)。請(qǐng)解釋。 參考答案 一、填空題 1.核苷酸 2.種 組織 3.二 A G 4.堿基 核糖 磷酸 5.細(xì)胞核 細(xì)胞質(zhì) 6.β 糖苷 磷酸二酯鍵 7.反式 8.堿基 糖環(huán) 9.在嘌呤堿基和嘧啶堿基中存在于共軛雙鍵 10.胸腺嘧啶 11.G-C對(duì) 12.增加 不變 13.窄 14.寬 低 高 1 15.中度重復(fù)序列 單一序列 16.單 Northerm 17.樣品的均一度 DNA的濃度 DNA片段大小 溫度的影響 溶液的離子強(qiáng)度 18.正 19.B 20.A 粗短 21.腺苷酸 22.堿基堆積力 氫鍵 離子鍵 范德華力 23.倒L 氨基酸接受臂 反密碼子 24.雙脫氧法 化學(xué)斷裂法 25.溫度升高 酸堿變化 有機(jī)溶劑 26.MRNA 二、是非題 1.錯(cuò)。脫氧核糖核苷中的糖環(huán)2′位沒(méi)有羥基。 2.錯(cuò)。另一條鏈的堿基順序?yàn)椋簆GpTpCpCpApG。 3.對(duì)。DNA的Tm值與DNA中所含的G-C對(duì)含量成正比,即與A-T對(duì)含量成反比。 4.錯(cuò)。真核生物的染色體為DNA與組蛋白質(zhì)的復(fù)合體,原核生物的染色體DNA與堿性的精胺、亞精胺結(jié)合。 5.錯(cuò)。核酸的紫外吸收與溶液的pH值相關(guān)。 6.對(duì)。天然存在的游離核苷酸一般為5′-核苷酸。 7.對(duì)。天然B型DNA的局部區(qū)域可以出現(xiàn)Z型DNA,說(shuō)明B型DNA與Z型DNA之間可以相互轉(zhuǎn)變的。 8.對(duì)。負(fù)超螺旋DNA容易解鏈,便于進(jìn)行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄等反應(yīng)。 9.對(duì)。高度重復(fù)序列一般位于著絲點(diǎn)附近,與紡錘體形成有關(guān),通常不轉(zhuǎn)錄。 10.錯(cuò)。mRNA是細(xì)胞內(nèi)種類最多、但含量很低的RNA。細(xì)胞內(nèi)含量最豐富的RNA是rRNA。 11.對(duì)。不同tRNA中額外環(huán)大小差異很大,因此可作為tRNA分類的指標(biāo)。 12.對(duì)。真核生物成熟mRNA的5′為帽子結(jié)構(gòu),即m7G(5′)ppp(5′)N-,因此5′端也是3′-OH。 13.對(duì)。目前為止發(fā)現(xiàn)的修飾核苷酸大多是在tRNA中找到的。 14.錯(cuò)。對(duì)于提純的DNA樣品,如果測(cè)得的OD260/OD280<1.8,則說(shuō)明樣品中有蛋白質(zhì)殘留。 15.錯(cuò)。核酸變性或降解時(shí),堿基堆疊被破壞,堿基暴露,光吸收增加,稱為增色效應(yīng)。 16.對(duì)。同源DNA在適合條件下,可以雜交,雜交程度與同源性成正比。 17.錯(cuò);虮磉_(dá)的產(chǎn)物可以是蛋白質(zhì)或RNA。 18.對(duì)。線粒體和葉綠體具有自己的一套復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯體系,因此也含有核糖體。 三、選擇題 1.(D)插入一個(gè)核苷酸會(huì)導(dǎo)致移碼突變,即從突變處開(kāi)始,后面有所有氨基酸序列變化,造成編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)、功能的很大變化,這往往是致死性的。插入或或丟失三個(gè)核苷酸只造成編碼的蛋白質(zhì)增加或減少一個(gè)氨基酸;單個(gè)堿基的相互取代也最多影響這個(gè)堿基所在的密碼子編碼的氨基酸,對(duì)編碼的蛋白質(zhì)產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)、功能影響較小。 2.(A)雙鏈DNA熱變性后細(xì)長(zhǎng)的雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞,形成無(wú)規(guī)卷曲,因此黏度下降,沉降系數(shù)和浮力密度增加,變性后堿基堆積被破壞,核苷酸暴露,紫外吸收增加。 3.(E)核酶是具有催化能力的RNA,因此不是核酸與蛋白質(zhì)組成的復(fù)合物。 4.(D)艾滋病病毒HIV是一種單鏈RNA病毒。 5.(D)RNA經(jīng)NaOH水解先生成2′,3′-環(huán)核苷酸,再水解為2′或3′-核苷酸,得到2′-核苷酸和3′-核苷酸的混合物。 6.(C)密碼子是mRNA上的三個(gè)相鄰的、編碼氨基酸的堿基,與反密碼子反向互補(bǔ)配對(duì),因此反密碼子UGA所識(shí)別的密碼子是UCA。 7.(E)對(duì)DNA片段作物理圖譜分析,需要將DNA用限制性內(nèi)切酶切成一組片段,以特異序列為標(biāo)記,確定這些片段的位置,即得到DNA和物理圖譜。 四、問(wèn)答題 1.(1)(2.5×107/650)×0.34=1.3×104nm=13μm (2)650/0.34=1.9×103/nm=1.9×106/μm (3)88×0.34nm=30nm=0.03μm (4)104×3×0.34=106nm≈0.11μm (5)(96000/120)×3×320=76800 (6)(17-15)×103/0.34=5.88×103bp 2.(1)設(shè)DNA的兩條鏈分別為α和β,那么 Aα=Tβ,Tα=Aβ,Cα=Cβ,Cα=Cβ, 因?yàn)椋ǎ?SUB>α+Gα)/(Tα+Cα)=(Tβ+Cβ)/(Aβ+Gβ)=0.7 所以,互補(bǔ)鏈中(Aβ+Gβ)/(Tβ+Cβ)=1/0.7=1.43 (2)在整個(gè)分子中 因?yàn),A=T,G=C, 所以,A+G=T+C,(A+G)/(T+C)=1 (3)假設(shè)同1,則 Aα+Tα=Tβ+Aβ,Gα+Cα=CβGβ, 所以,(Aα+Tα)/(Gα+Cα)=(Aβ+Tβ)/(Gβ+Cβ)=0.7 (4)(Aα+Tα+Aβ+Tβ)/(Gα+Cα+Gβ+醫(yī).學(xué)全在線Cβ)=2(Aα+Tα)/(Gα+Cα)=0.7 3.mRNA是信使RNA,它將DNA上的遺傳信息轉(zhuǎn)錄下來(lái),攜帶到核糖體上,在那里以密碼的方式控制蛋白質(zhì)分子中的氨基酸的排列順序,作為蛋白質(zhì)合成的直接模板。 rRNA是核糖體RNA,與蛋白質(zhì)共同構(gòu)成核糖體,核糖體不僅是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所,還協(xié)助或參與了蛋白質(zhì)合成的起始。 tRNA是轉(zhuǎn)運(yùn)RNA,與合成蛋白質(zhì)所需的單體:氨基酸形成復(fù)合體,將氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖體中mRNA的特定位置上。 4.因?yàn)镈NA分子含大量磷酸基團(tuán),不含硫,而蛋白質(zhì)中部分氨基酸含硫,但都不含磷,所以32P只標(biāo)記在DNA分子中,而35S只標(biāo)記在蛋白質(zhì)的外殼上。 如果用35S標(biāo)記的噬菌體重復(fù)實(shí)驗(yàn),那么在子代病毒中就會(huì)出現(xiàn)帶32P標(biāo)記的病毒。因?yàn)槭删w感染細(xì)菌時(shí)其蛋白質(zhì)外殼并不進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),子代噬菌體的蛋白質(zhì)外殼是在細(xì)菌體內(nèi)新合成的,因此不帶標(biāo)記。 如果用32P標(biāo)記的噬菌體重復(fù)實(shí)驗(yàn),那么在子代病毒中就會(huì)出現(xiàn)帶32P標(biāo)記的病毒。因?yàn)槭删w感染細(xì)菌時(shí)其核酸部分將進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi),并作為遺傳物質(zhì)傳給子代噬菌體,因此在子代病毒中可以找到帶32P標(biāo)記的病毒。 5.因?yàn),A=28.9% 所以,T=A=28.9%,G=C=(1-0.289×2)/2=0.211=21 6.(1)陽(yáng)離子可以中和DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán),減弱DNA鏈間的靜電作用,促進(jìn)兩條互補(bǔ)的多核苷酸鏈的相互靠近,從而促進(jìn)DNA的復(fù)性。 (2)溫度升高可使DNA變性,因此溫度降低到熔點(diǎn)以下可以促進(jìn)DNA的復(fù)性。 (3)DNA鏈的濃度增加可以加快互補(bǔ)鏈隨機(jī)碰撞的速度,從而促進(jìn)DNA的復(fù)性。 7.組蛋白與DNA之間的結(jié)合依靠的是組蛋白帶正電的堿性基團(tuán)與DNA帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)之間的靜電引力,如果用稀酸處理復(fù)合物,則磷酸基團(tuán)質(zhì)子化而失去所帶的負(fù)電荷,復(fù)合物解離。如果用高鹽溶液處理復(fù)合物,則陽(yáng)離子與磷酸基團(tuán)結(jié)合而取代了組蛋白,導(dǎo)致組蛋白與DNA解離。 8.除了核內(nèi)DNA外,原核生物酵母細(xì)胸胞的線粒體內(nèi)還含有少量DNA,這些DNA編碼題中其余三種亞基的氨基酸順序。 9.真核生物染色體DNA含有核小體結(jié)構(gòu),核小體是由大約200bp的DNA雙鏈圍繞組蛋白核心組成的,彼此相連成念珠狀結(jié)構(gòu),即染色體DNA。圍繞組蛋白核心的DNA不被DNase I水解,而核小體與核小體之間起連接作用的DNA的磷酸二酯鍵對(duì)DNase I敏感,因此水解產(chǎn)生長(zhǎng)約200bp的DNA片段。 | ||||