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MS-PCR方法是由Herman等[12]于1996年首創(chuàng)，該方法利用了PCR靈敏、快速、簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，已經(jīng)成為當(dāng)前檢測(cè)DNA甲基化的最常用方法之一。MSP技術(shù)檢測(cè)基因甲基化狀態(tài)敏感度高，并且可以避免限制性酶切不全所帶來的假陽性結(jié)果，能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)CpG位點(diǎn)的甲基化情況，是研究基因甲基化的較為實(shí)用的技術(shù)。而MSP結(jié)合測(cè)序方法不僅能明確甲基化的確切位置和甲基化程度，而且更敏感，需要的DNA少，能用于少量DNA的甲基化分析，因而給甲基化檢測(cè)提供方便。Estelle等[13]曾嘗試應(yīng)用MS-PCR法，取隨機(jī)人群的血清、尿液、氣管分泌液、淋巴結(jié)組織活檢標(biāo)本做基因甲基化檢查，結(jié)果具有早期診斷意義，部分病例在腫瘤確診之前就已經(jīng)明確報(bào)告甲基化陽性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，乳腺癌組織較正常乳腺組織ERα基因啟動(dòng)子A、B區(qū)甲基化率顯著增高，ERα陰性乳腺癌組的ERα啟動(dòng)子A、B區(qū)甲基化率較ERα陽性乳腺癌組的均顯著增加，ERα啟動(dòng)子A、B區(qū)甲基化與ER蛋白表達(dá)均呈顯著的負(fù)相關(guān)。因此，ERα啟動(dòng)子A、B區(qū)的甲基化狀態(tài)不僅可以早期預(yù)測(cè)乳腺組織有無惡性變化的可能，而且對(duì)于ERα陽性乳腺癌，可以在ERα向陰性轉(zhuǎn)變之前發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤復(fù)發(fā)的可能。乳腺癌細(xì)胞系的研究表明，去甲基化藥物可以使乳腺癌細(xì)胞的ER恢復(fù)表達(dá)，恢復(fù)對(duì)抗雌激素療法的敏感性，從而提高乳腺癌內(nèi)分泌治療的有效率[14]。因此，ER啟動(dòng)子區(qū)CpG島的甲基化狀況可以作為去甲基化治療的指征，依據(jù)患者甲基化的檢測(cè)結(jié)果，可以進(jìn)行去甲基化治療，使ER轉(zhuǎn)陽，提高內(nèi)分泌治療有效率。由于近年來，應(yīng)用DNA甲基化標(biāo)志進(jìn)行臨床癌癥檢測(cè)和診斷已經(jīng)取得了顯著的進(jìn)展。總之，檢測(cè)ERα啟動(dòng)子區(qū)的甲基化狀態(tài)，因其具有高靈敏度，操作簡(jiǎn)便，快速，檢測(cè)標(biāo)本要求低等特點(diǎn)，可以作為乳腺癌早期診斷、分型、復(fù)發(fā)的生物學(xué)指標(biāo)，選擇內(nèi)分泌治療的預(yù)測(cè)因子以及提高內(nèi)分泌治療有效率的方法醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站payment-defi.com。
本研究結(jié)果顯示，ERα啟動(dòng)子甲基化率與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否無顯著相關(guān)，提示ER基因甲基化與乳腺癌的轉(zhuǎn)移潛能無關(guān)。本研究結(jié)果在12例ER表達(dá)陰性的乳腺癌中，分別有4例、5例未檢測(cè)到ERα啟動(dòng)子A區(qū)、B區(qū)甲基化，提示ERα失表達(dá)還可能與其他位點(diǎn)甲基化有關(guān)，或者還有其他一些機(jī)制參與，DNA甲基化并不是其蛋白失表達(dá)的唯一機(jī)制，而是多種機(jī)制共同參與的結(jié)果。
【參考文獻(xiàn)】
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