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主要為組織細(xì)胞，另可見多核巨細(xì)胞、漿細(xì)胞，偶見中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、壞死細(xì)胞(Fig2).組織細(xì)胞及多核巨細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)見大量溶酶體樣結(jié)構(gòu)(Fig3).
圖2 多核巨細(xì)胞(MN)、組織細(xì)胞(H)、淋巴細(xì)胞(L)、漿細(xì)胞(P)、壞死細(xì)胞(D)，壞死的細(xì)胞內(nèi)有殘留細(xì)胞器.Fig2c中有可疑的球菌(C)及桿菌(B)(略)
Fig2 Pictures show multinuclear giant cells(MN)，histocytes(H)，lymphocyte(L)，plasmocyte(P)，necrosis cell(D).There are organelles in the necrosis cell.The coccus(C)and bacilli(B)can be seen in the Fig2c
圖3 多核巨細(xì)胞(a)及組織細(xì)胞(b)內(nèi)均有大量溶酶體樣結(jié)構(gòu)(略)
Fig3 There are a lot of lysosome-like structures in the multinuclear giant cells(a)and histocytes(b)
圖4 典型的球菌(a)及桿菌(b)Fig4 Coccus(a)and bacilli(b)(略)
2.2 細(xì)菌
第一次觀察時主要注意到少數(shù)細(xì)胞內(nèi)有典型的球菌(Fig4a)，并發(fā)現(xiàn)一典型的細(xì)胞外桿菌(Fig4b)，未發(fā)現(xiàn)真菌、病毒顆粒及其他病原體.對多核巨細(xì)胞及組織細(xì)胞中的溶酶體樣結(jié)構(gòu)反復(fù)觀察分析，發(fā)現(xiàn)大部分具有桿菌的特點，多為雙層膜結(jié)構(gòu)，有空泡，大小0.3μm×1μm(Fig5a～g)，少數(shù)直徑約2μm(Fig5m～o)，有缺少界膜呈空泡狀的核區(qū);細(xì)胞質(zhì)膜多較清楚(Fig5a～p)，由二個電子致密層與一個電子透明層構(gòu)成，厚度5～10nm(Fig6);細(xì)胞壁僅見于一個細(xì)菌中，基本結(jié)構(gòu)為二個電子致密層與一個電子透明層，厚度不均，約30～60nm(Fig6).
圖5 多核巨細(xì)胞及組織細(xì)胞內(nèi)的溶酶體樣結(jié)構(gòu)中，部分具有典型的細(xì)菌形態(tài)，有核區(qū);細(xì)胞質(zhì)膜多較清楚(略)
Fig5 Part of lysosomoid structures in the multinuclear giant cells and histocytes show typical bacilli form.There are nuclear area and clear cytoplasmic membrane in most of them
3 討論
對于懷疑由病原體所致的疾患，電鏡下發(fā)現(xiàn)損害中的病原體是最具說服力的證據(jù).此類病例中，多位學(xué)者曾認(rèn)真進(jìn)行過細(xì)菌分離等探討，但一直未能找到病因及挽救患者的生命.我們第一次采用透射電鏡對該病進(jìn)行觀察，找到了病原菌，雖然第一例患者仍未能被救活，但電鏡下觀察到當(dāng)時認(rèn)為的“桿菌”，并依據(jù)此發(fā)現(xiàn)推斷以往反復(fù)細(xì)菌培養(yǎng)均未獲得成功可能是該菌為嚴(yán)格厭氧菌，為此進(jìn)行嚴(yán)格的厭氧培養(yǎng)并分離出病原及救活了患者，即電鏡觀察為該病確定奠定了非常重要的基礎(chǔ).
行電鏡觀察的兩個病例中，均找到了球菌，細(xì)菌分離培養(yǎng)第1例每次均為表皮葡萄球菌，第2例為頭狀葡萄球菌.表皮葡萄球菌及頭狀葡萄球菌均系凝固酶陰性的葡萄球菌，易于分離培養(yǎng).以往的研究者均未獲結(jié)果，其失敗原因有三種可能:一是細(xì)菌培養(yǎng)前應(yīng)用抗生素使其被殺滅;二是我們的兩例患者均碰巧伴有混合感染，其他的為單一感染或伴有另外的細(xì)菌感染;三是此類葡萄球菌為最常見的污染菌，檢驗人員將其視為污染菌未予報告，因為我們的第一例中曾發(fā)生過此種情況.各種凝固酶陰性的葡萄球菌在患者抵抗力低下時可以作為一種條件致病菌造成化膿性感染，因其對多數(shù)抗菌素敏感，易于治療.本病的皮損從不發(fā)生化膿，使用對分離出的葡萄球菌敏感的抗菌素未能挽救患者的生命，提示致患者死亡的細(xì)菌不是它，而是厭氧性放線菌.葡萄球菌或許在本病中的作用只是消耗氧，為厭氧菌的生長創(chuàng)造條件.
圖6 Fig5局部放大，示細(xì)胞壁(空十字)有2個電子致密層與1個電子透明層，厚度不均，約30～60nm.細(xì)胞質(zhì)膜(彎箭頭)也由2個很薄的電子致密層與1個電子透明層構(gòu)成，總厚度約10nm(略)
Fig6 It is local magnification of Fig5to show cell wall(empty cross)，which consists of2electron-dense layers and1electron-lucent layer.It is uneven in thickness.Cytoplas-mic membrane(curve arrow)also consists of2electron-dense layers and1electron-lucent layer but much thin
