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醫(yī)學(xué)論文范文:蜂膠黃酮對D半乳糖致衰老小鼠腦蛋白質(zhì)、核酸代謝的影響
【摘要】 目的 探討蜂膠黃酮對衰老模型小鼠學(xué)習(xí)記憶行為的影響及其作用機制。方法 采用同位素標(biāo)記物體內(nèi)摻入法觀察蜂膠黃酮各組小鼠腦蛋白質(zhì)及核酸代謝的變化。結(jié)果 蜂膠黃酮增加小鼠腦組織蛋白質(zhì)、DNA和RNA含量。結(jié)論 蜂膠黃酮能明顯增強小鼠學(xué)習(xí)記憶功能，其作用機制與其促進的蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子形成密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】 蜂膠黃酮 學(xué)習(xí)記憶能力 蛋白質(zhì) 核酸代謝
近年來研究發(fā)現(xiàn)蜂膠具有明顯的抗癌、調(diào)節(jié)血糖、增強機體免疫功能、抗菌、抑制病毒等效應(yīng)〔1〕，并可提高小鼠肝臟過氧化氫酶與超氧化物歧化酶的活性〔2〕。為進一步探討蜂膠黃酮抗衰老作用機制,本研究通過同位素標(biāo)記物摻入法觀察蜂膠黃酮對衰老模型小鼠腦蛋白質(zhì)及核酸代謝的影響，為蜂膠黃酮抗衰老的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 藥物及試劑
蜂膠黃酮由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)生化教研室提純，并經(jīng)黑龍江省中藥研究所鑒定，稀釋成黃酮含量為15 mg/ml使用。D半乳糖購于Sigma公司。3H胸腺嘧啶核苷（3HTdR)、3H尿嘧啶核苷（3HUR)和3H亮氨酸（3HLeu)均購于中國科學(xué)院上海原子核研究所。PPO（2、5二苯基惡唑)、POPOP（1，4雙〔5苯基惡唑基2〕苯)為上海化學(xué)試劑一廠產(chǎn)品，閃爍純。三氯醋酸、無水乙醇、乙醚、甲酸、二氧六環(huán)、萘均為分析純。
1.2 儀器
液體閃爍計數(shù)儀，Beckman公司；D37520型高速冷凍離心機,德國HERAEUS公司；JY98Ⅲ型超聲波細胞粉碎機,寧波科生儀器廠；跳臺裝置為蚌埠醫(yī)學(xué)院無線電二廠醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站payment-defi.com。
1.3 方法
1.3.1 分組
昆明種健康小鼠，體重(25±2) g，雌雄各半，小白鼠常規(guī)喂養(yǎng)6 d，隨機分為空白對照組、D半乳糖衰老模型和蜂膠黃酮組，每組10只，實驗小鼠均由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。除空白對照組外, 衰老模型組和蜂膠黃酮組每天用D半乳糖150 mg/kg頸背部皮下注射連續(xù)30 d，空白對照組皮下注射等劑量生理鹽水,自由進食進水；造模同時蜂膠黃酮組灌胃蜂膠黃酮300 mg/kg，空白對照組及衰老模型組灌服等量生理鹽水，每天1次，連續(xù)給藥30 d。衰老模型組連續(xù)給D半乳糖30 d后,小鼠行動遲緩,毛色灰暗,形體瘦弱,呈明顯的衰老體征,證明衰老模型成功建立〔3〕。
1.3.2 蜂膠黃酮對3HLeu摻入小鼠腦組織蛋白質(zhì)影響〔4〕
按照上述方法連續(xù)給藥30 d。實驗前12 h禁食，各組腹腔注射3HLeu 1.48×105 bq(4 μci)/10 g,4 h后斷髓處死小鼠，迅速取出腦組織，用濾紙吸去血液，剪碎，用生理鹽水制成50 mg/ml的組織勻漿。取0.5 ml組織勻漿置于10 ml試管中，加入10%三氯醋酸2 ml，沉淀離心，3 500 r/min，10 min，棄去上清液，將沉淀用5%三氯醋酸和1∶1醇醚混合物再各洗1次，棄去上清，向沉淀中加88%甲酸0.5 ml，置于90℃水浴中消化20 min，取0.1 ml消化液加入含4 ml閃爍液（PPO 3.0 g、POPOP 0.5 g、萘60 g，加二氧六環(huán)至500 ml，避光保存)的閃爍杯中，次日用液體閃爍計數(shù)儀測定樣品放射性。
