復(fù)方炔諾孕酮片—炔諾孕酮和炔雌醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復(fù)方炔諾孕酮片中炔諾孕酮和炔雌醇的含量。

本方法適用復(fù)方炔諾孕酮片。

將供試品內(nèi)精密加入內(nèi)標(biāo)溶液，加入適量流動(dòng)相經(jīng)超聲處理溶解，放冷，用流動(dòng)相定量稀釋，搖勻，濾過，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處檢測炔諾孕酮（C₂₁H₂₈O₂)和炔雌醇（C₂₀H₂₄O₂)和內(nèi)標(biāo)醋酸甲地孕酮的吸收值，計(jì)算出其含量。

乙腈

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按炔諾孕酮峰計(jì)算應(yīng)不低于 3000，各成分峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 水= 60 40

2.2 檢測波長：220nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

取本品20丸，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于炔諾孕酮1.5mg)，置10mL量瓶中。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取炔諾孕酮和炔雌醇對(duì)照品適量，用乙腈溶解并定量稀釋制成每1mL中約含有炔諾孕酮1.5mg與炔雌醇0.15mg的溶液，精密量取此溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各1mL，置10mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得。

3. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

取醋酸甲地孕酮適量，加乙腈稀釋每1mL含1mg的溶液，即得。

4. 供試品溶液的制備

上述供試品置10mL量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1mL，加流動(dòng)相適量，超聲處理使溶解，放冷，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液和供試品溶液的續(xù)濾液20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長220nm處測定炔諾孕酮和炔雌醇及內(nèi)標(biāo)醋酸甲地孕酮的吸收值，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積分別計(jì)算炔諾孕酮和炔雌醇的含量，即得。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p430。