輔酶Q10的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定輔酶Q₁₀（C₅₉H₉₀O₄)的含量。

本方法適用于輔酶Q₁₀。

避光操作。供試品制成無(wú)水乙醇溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處檢測(cè)輔酶Q₁₀吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 無(wú)水乙醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按輔酶Q₁₀峰計(jì)算不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 無(wú)水乙醇=50 50。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：275nm

2.3 柱溫：室溫

1. 稱(chēng)取供試品

精密稱(chēng)取本品20mg，。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取輔酶Q₁₀對(duì)照品適量，同供試品配制，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

將供試品加無(wú)水乙醇約40mL在50℃水浴中振搖溶解，放冷后，移置100mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處測(cè)定輔酶Q₁₀的吸收值，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.653。