雌二醇—雌二醇的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定雌二醇（C₁₈H₂₄O₂)的含量。

本方法適用于雌二醇的含量測定。

取本品適量，加甲醇溶解并稀釋制成溶液，量取該溶液加內(nèi)標(biāo)后流動(dòng)相稀釋，注入液相色譜儀，在205nm波長處檢測，記錄色譜圖。另取對(duì)照品適量，同法測定，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

1. 甲醇

2. 乙腈

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈＋水=55 45

2.2 檢測波長：205nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取雌二醇對(duì)照品適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.50mg的溶液，搖勻，為對(duì)照品溶液。

2. 內(nèi)標(biāo)溶液的配制

精密稱取對(duì)羥基苯甲酸乙酯適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.75mg的溶液，搖勻，為內(nèi)標(biāo)溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.50mg的溶液，搖勻，為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

精密量取供試品溶液10mL與內(nèi)標(biāo)液5mL，置200mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。精密量取20μL注入高效液相色譜儀，于205nm波長處測定雌二醇的吸收值，另精密量取對(duì)照品溶液10mL同上處理，測定。計(jì)算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.829-830。