黃連上清丸—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法 2

本方法采用高效液相色譜法測定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥黃連上清丸。

將供試品加稀鹽酸，超聲處理，加稀鹽酸定容，作為供試品溶液。精密吸取對照品溶液和供試品溶液，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處檢測大黃酸吸收值，以外標法計算含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 磷酸

3. 稀鹽酸

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Hypersil C₁₈ 柱 (150 × 4.6mm，5µm)。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 磷酸 = 48 52 0.5

2.2 流速：1.0mL/min

2.3 檢測波長：260nm

2.4 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末0.5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿適量，加1％鹽酸溶液稀釋成每1mL含0.5mg鹽酸小檗堿的溶液，作為對照品儲備液。精密量取對照品儲備液2mL，置100mL容量瓶中，加1％鹽酸稀釋成每1mL含10µg鹽酸小檗堿的溶液，作為對照品溶液。

3. 標準溶液的配制

精密量取對照品儲備液，稀釋成鹽酸小檗堿濃度各為5、10、15、20、25µg/mL的溶液，濾過，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。

4. 供試品溶液的制備

將供試品置100mL容量瓶中，加1％鹽酸溶液適量，超聲處理，用1％鹽酸溶液定容，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1. 標準曲線的繪制

精密吸取上述標準溶液10µL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處測定小檗堿的吸收值，以對照品溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測定

精密吸取對照品溶液和供試品液各10µL，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長260nm處測定小檗堿的吸收值，以外標法計算出其含量。

林建陽，關(guān)軍. 高效液相色譜法測定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量. 中國民族醫(yī)藥雜志，2002，20(4)：544.