清胃黃連丸－鹽酸小檗堿的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定清胃黃連丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥清胃黃連丸。

供試品于索氏提取器中加熱回流，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)�用甲醇溶解，制成供試液，點(diǎn)樣、展開，UV－365燈下顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長λ＝343nm測量鹽酸小檗堿吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1.正丁醇

2.冰醋酸

3.甲醇

1 儀器

1.1 索氏提取器

1.2 薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2材料

2.1玻板

用20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 稱取供試品

精密稱取供試品樣品1.2g。

2, 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿適量，加鹽酸－甲醇(1:100)制成每1mL含0.2mg的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

3. 供試品溶液的制備

將供試品置索氏提取器中，加鹽酸－甲醇(1:100)提取至溶劑無色。將提取液濃縮，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度搖勻，過濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2.點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液、對照品溶液1～4μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況，以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以正丁醇-冰醋酸-水（7:1:2)10℃以下放置12小時(shí)的下層溶液為展開劑，展開至8～15cm時(shí)，取出薄層板，晾干。

4.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密吸取l，2，3，4μL，點(diǎn)樣于同—硅膠G薄層板上，放入以正丁醇－冰醋酸－水(7:1:2)飽和的層析缸中，展開，取出，熱風(fēng)吹至無正丁醇味，置UV365燈下確定斑點(diǎn)位置，以單波長反射法鋸齒掃描：λ＝343nm。Sx＝3，狹縫2mm×2mm，以吸收峰面積積分值對對照品點(diǎn)樣量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

5.含量測定

取出薄層板，熱風(fēng)吹至無正丁醇味，置UV365燈下確定斑點(diǎn)位置，以單波長反射法鋸齒掃描：λ＝343nm測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算。

韓桂茹，王元度，馮麗. 清胃黃連丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究. 中國中藥雜志，1993，18（2)：93-95.