蜂膠－白楊素、高良姜素的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定蜂膠中白楊素、高良姜素的含量。

本方法適用于蜜蜂科昆蟲意大利蜂Apis mellifera L.的干燥分泌物。

本品粉末加丙酮置索氏提取器中加熱回流，提取液回收溶劑至干，殘渣加甲醇溶解定容，搖勻，濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長268nm處檢測白楊素、高良姜素的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 0.15%磷酸溶液

3. 丙酮

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按白楊素峰計算應不低于6000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 0.15%磷酸溶液＝64 36

2.2檢測波長：268nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品粉末（過四號篩)0.1g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取白楊素對照品15mg，高良姜素對照品10mg，分別置50 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取1 mL，各置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過四號篩)約0.1g，精密稱定，置索氏提取器中，加丙酮100mL，加熱回流至提取液無色，提取液回收溶劑至干，殘渣用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長268nm處測定白楊素（C₁₅H₁₀O₄)、高良姜素（C₁₅H₁₀O₅)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p249。