燒傷靈酊－大黃素的測定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定燒傷靈酊中大黃素的含量。

本方法適用于中成藥燒傷靈酊。

1 甲醇

2 石油醚60～90°C

3 甲酸乙酯

4 甲酸

5 無水乙醇

6 磷酸溶液，0.1％

7 硅膠（色譜用，60～160目)

8 五氧化二磷

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按大黃素峰計應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 0.1％磷酸溶液 = 85 15

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室溫

1.稱取供試品

精密量取本品2mL。

2.對照品溶液的制備

取大黃素對照品（經(jīng)五氧化二磷干燥過夜)適量，精密稱定，加無水乙醇溶解，制成每1mL含0.01mg的溶液。

3.供試品溶液的制備

供試品置蒸發(fā)皿中，加硅膠1g，置溫水浴上蒸干，移至硅膠色譜柱（2g，內(nèi)徑17mm，干法裝柱)，用石油醚－甲酸乙酯－甲酸（100：100：2)混合溶液90mL分次減壓洗脫，收集洗脫液，置100mL量瓶中，并用混合溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。