黃氏響聲丸－貝母素乙的測(cè)定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測(cè)定黃氏響聲丸中貝母素乙的含量。

本方法適用于黃氏響聲丸中貝母素乙含量的測(cè)定。

供試品加乙醚－氯仿－乙醇混合溶液，超聲處理，冷浸，濾過，揮干濾液，殘?jiān)�用氯仿溶解，制成供試液，點(diǎn)樣、展開，以稀碘化鉍鉀溶液顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長λs=515nm，λ_R=650nm測(cè)量貝母素乙（C₂₇H₄₃NO₃)吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 氨水

2 .乙醚

3 .氯仿

4 .乙醇

5 .石油醚

6 .醋酸乙酯

7 .甲醇

8 .稀碘化鉍鉀試液：取堿式硝酸鉍0.85g，加冰醋酸10mL與水40mL溶解后，分取5 mL，加碘化鉀溶液（4→10)5mL，再加冰醋酸20mL，用水稀釋至100mL，即得。

1 儀器

1.1超聲提取器

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動(dòng)涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

2.3硅藻土

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取貝母素乙對(duì)照品適量，加氯仿制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品5g，除去包衣，研細(xì)，精密稱取粉末（過四號(hào)篩)約4g，加硅藻土適量，充分?jǐn)嚢杈鶆�，加濃氨試�?mL使?jié)駶�，密塞，放�?0分鐘，加乙醚－氯仿－乙醇（50：16：5)混合溶液50mL，超聲處理30分鐘，冷浸過夜，濾過，藥渣用少量上述混合溶液洗滌3次，合并洗液和濾液，揮干，殘?jiān)�用氯仿溶解，轉(zhuǎn)移至 2mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺(tái)上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2. 點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液 10μL、對(duì)照品溶液 4μL與 5μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以石油醚（60～90°C)－醋酸乙酯－甲醇－濃氨試液（10：10：2：1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液，晾干。

4. 含量測(cè)定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行掃描，波長：λs=515nm，λ_R=650nm， 測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算。

用外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會(huì)編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.590。