方法名稱: |
虎杖— 白藜蘆醇含量的測定 — HPLC-UV2 |
應(yīng)用范圍: |
本方法適用于測定虎杖中白藜蘆醇含量 |
方法原理: |
取本品加95%乙醇回流提取,濃縮加水稀釋,過聚酰胺柱,經(jīng)液相色譜分離,300nm下測定含量,外標(biāo)法計算含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器設(shè)備 島津LC26A 高效液相色譜儀; 色譜條件 色譜柱:甲醇-水(35∶65);色譜柱:ODS2C18柱(4.6 mm ×200 mm);流速: 0.8 ml/ min;測定波長:300nm,進樣量:20μl;柱溫:室溫。 |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取白藜蘆醇對照品約5 mg,置25 ml 容量瓶中,用甲醇溶解并稀釋到刻度,備用。 供試品溶液的制備 精密稱取虎杖粉末(過40目篩)50g,用95 %乙醇水浴回流提取三次,第一次用4 倍量乙醇回流提取3 小時,第二、三次分別用3 倍量乙醇回流提取各1 小時,合并提取液,冷置,過濾,濾液減壓濃縮至小體積,加蒸餾水200ml,水浴揮發(fā)去殘余乙醇,并保溫15 分鐘,過濾,濾液上聚酰胺柱,大量水沖至無色后,用10 %乙醇沖洗,色淡后用30 %乙醇沖洗,收集30 %乙醇沖洗液,減壓濃縮并定容于100ml容量瓶中,精密吸取上述溶液1ml,置10ml 容量瓶中,甲醇稀釋至刻度 |
操作步驟: |
精密吸取 白藜蘆醇對照液以及供試品溶液20μl,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算白藜蘆醇含量 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
朱鴻津等. HPLC 法測定虎杖中白藜蘆醇含量. 藥學(xué)研究.2001,2(25):110~112 |