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苦參—氧化苦參堿—RP-HPLC

  
方法名稱:
  苦參苦參堿—RP-HPLC
應(yīng)用范圍:
  本方法適用于苦參中氧化苦參堿含量的測定
方法原理:
 本品粉末加100倍量(20 mL)2 %醋酸溶液,靜置并離心,經(jīng)液相色譜分離,在210 nm處測定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器    日本島津LC-10AD液相色譜儀;日本島津SPD-10A紫外檢測器;日本島津CKChromTM色譜工作站

色譜條件    色譜柱:Hypersil ODS2(大連依利特,200 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:甲醇-乙腈-水-磷酸(10∶30∶65∶0.05,含33 mmol/L SDS);檢測波長:210 nm;柱溫:室溫;進(jìn)樣量:20 μL
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液的制備    取氧化苦參堿對(duì)照品約22 mg,精密稱定,置50 mL量瓶中,用甲醇-水(10∶90)溶解并定容至刻度,搖勻,配制成含氧化苦參堿0.436 mg/mL的溶液。

供試品溶液的制備    取苦參粉末0.2 g,精密稱定,置于離心管中,精密加入100倍量(20 mL)2 %醋酸溶液,室溫下靜置過夜。以4000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min,精密量取上清液2.0 mL置10 mL量瓶中,用水定容至刻度,搖勻。經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液備用。
操作步驟:
  分別精密吸取氧化苦參堿對(duì)照液以及苦參供試品溶液各20 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算氧化苦參堿含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:payment-defi.com)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  張蕾,陳曉輝,畢開順.RP-HPLC法測定苦參中氧化苦參堿的含量.中藥材. 2004.27(5):345~346
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