苦參生物堿部位—氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿—HPLC

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方法名稱：	苦參生物堿部位—氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿—HPLC
應(yīng)用范圍：	本方法適用于苦參生物堿部分中氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿含量的測(cè)定
方法原理：	本品生物堿部位加70 %乙醇超聲溶解，經(jīng)液相色譜分離，在220 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：	儀器 Waters515高效液相色譜儀；2487紫外檢測(cè)器；Empower軟件；25 μL可調(diào)進(jìn)樣器色譜條件色譜柱：Agilent Zorbax C₁₈色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動(dòng)相：溶劑A為10 mmol/L醋酸氨水溶液（0.1 %氨水，pH=9.2)，溶劑B為20 mmol/L醋酸銨的甲醇-乙腈（1∶1)混合溶液，洗脫條件為溶劑A-溶劑B梯度洗脫（90∶10→82∶12→66∶34→60∶40，時(shí)間：0 min→8 min→14 min→28 min)；流速：0.8 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；柱溫：35 ℃
試樣制備：	對(duì)照品溶液的制備精密稱取氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿對(duì)照品2.53、2.75、2.58和1.56 mg，分別置25 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻，備用。供試品溶液的制備苦參藥材用稀醇回流提取，提取物加水分散，離心，得水溶液和不溶物，不溶物加酸水超聲分散，離心，得酸水液，與上述水溶液合并，調(diào)中性后濃縮至一定體積，再繼續(xù)調(diào)pH至8，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱樹(shù)脂柱水洗除雜后，用稀醇洗脫，收集醇洗脫液，回收溶劑至干，殘留物減壓干燥，得苦參生物堿部位。精密稱取苦參生物堿部位約5 mg，置5 mL量瓶中，加70 %乙醇超聲溶解，并稀釋至刻度，搖勻，備用。
操作步驟：	分別精密吸取氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿對(duì)照液以及苦參生物堿部位供試品溶液各15 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算氧化苦參堿、氧化槐果堿、苦參堿和槐果堿含量。
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備注：
參考文獻(xiàn)：	朱麗君，劉斌，石任兵.HPLC法測(cè)定苦參生物堿部位中4種成分含量.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2007.30（11)：780~783