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關木通及配伍中藥-馬兜鈴酸A的含量測定方法-RP-HPLC3

  
方法名稱:
  關木通及配伍中藥-兜鈴酸A的含量測定-RP-HPLC3
應用范圍:
  用于關木通及配伍中藥中馬兜鈴酸A的含量測定
方法原理:
 本品細粉加蒸餾水煎煮,經液相色譜分離,在250 nm處測定峰面積,外標法計算含量
儀器設備及實驗條件:
 

儀器    美國Waters高效液相色譜系統(tǒng),包括515泵、紫外檢測器(2996二極管陣列)、M32軟件

色譜條件    色譜柱:Symmetry ODS(C18,4.6 mm×250 mm,5 μm);流動相:乙腈/(水+冰醋酸)58∶42(V /V),其中,水∶冰醋酸= 52.5∶1(V /V);流速:1 mL/min;柱溫:室溫;檢測波長:250 nm;進樣量:5 μL(除另有說明外)
試樣制備:
 

對照品溶液制備    稱取馬兜鈴酸A對照品7 mg,置于50 mL容量瓶中,加無水乙醇溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得濃度為0.14 g/L的對照品儲備液。準確移取上述對照品溶液1.0 mL5 mL容量瓶中,用無水乙醇定容至刻度,搖勻,即得濃度為0.028 g/L的馬兜鈴酸對照品溶液。

    供試品溶液制備   取藥材關木通、生甘草,烘干粉碎,準確稱取0.6 g,置于200 mL燒杯中,加120 mL蒸餾水,煎煮30 min,過濾,收集濾液,殘渣加80 mL蒸餾水,煎煮30 min,過濾,收集濾液,合并兩次濾液,置于水浴上,濃縮至干。用適量的無水乙醇溶解并定量轉移至10 mL的容量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻。放入冰箱冷藏,靜置過夜,抽取上清液適量,用針頭式過濾器過濾,棄去初濾液,收集續(xù)濾液,放入1 mL塑料離心管中,即得。
操作步驟:
  分別精密吸取馬兜鈴酸A對照液以及關木通及配伍中藥供試品溶液適量,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算馬兜鈴酸A含量。
附件:
  點擊下載 (解壓密碼:payment-defi.com)
備注:
 
參考文獻:
  劉養(yǎng)清,趙慧輝,侯娜. 反相高效液相色譜法測定關木通及配伍中藥中馬兜鈴酸A. 分析化學(FENXIHUAXUE)研究簡報.2006,34(9):161~164
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