方法名稱(chēng)： |
白芍提取物--白芍總苷含量測(cè)定--HPLC法2 |
應(yīng)用范圍： |
白芍提取物中白芍總苷含量測(cè)定 |
方法原理： |
白芍藥材水提取得白芍總苷，芍藥苷對(duì)照品與白芍總苷經(jīng)5%NaOH經(jīng)超聲處理，沸水浴水解，經(jīng)液相色譜儀分離，在230nm處測(cè)定峰面積，以為芍藥苷對(duì)照品，計(jì)算其中白芍總苷的含量。 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 高效液相色譜儀，包括Waters1525泵，2487雙通道紫外檢測(cè)器，Waters柱溫箱，Breeze液相色譜工作站； 色譜條件 色譜柱：Phenomenex Luna C18 （2)色譜柱(4.6 mm×150 mm，5μm)；柱溫：35℃；流動(dòng)相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀-異丙醇-醋酸(67：173：4：4)；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；流速1.0mL/min。 |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取8.8mg芍藥苷對(duì)照品，置10mL量瓶中，加5％氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻。精密吸取該溶液1mL，置5mL具塞試管中，沸水浴水解2h，冷卻，轉(zhuǎn)移至20mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，得濃度為44g/mL 的對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 稱(chēng)取市售白芍飲片1.0kg，加水10倍，煎煮2.0h，第2次加水8倍，煎煮1.5h，合并煎液，濾過(guò)，濾液過(guò)已處理好的大孔吸附樹(shù)脂，先用水洗滌，再用70%乙醇洗脫，回收乙醇，干燥，得紫棕色粉末，即為白芍總苷。精密稱(chēng)取白芍總苷樣品約30mg置25mL量瓶中，加5％氫氧化鈉溶液至刻度，超聲，溶解，搖勻。精密吸取該溶液0.5mL，置5mL具塞試管中，沸水浴水解2h后，冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度(呈弱酸性)，搖勻，即得。 |
操作步驟： |
分別精密取對(duì)照品溶液和供試品溶液5μL注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算濃度。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
劉玉紅,陳燕,黃志芳等.RP-HPLC測(cè)定白芍提取物的總苷含量.中國(guó)中藥雜志.200,32(ll):1114-1115 |
