方法名稱: |
黃柏-小檗堿的含量測定-HPLC-UV5 |
應(yīng)用范圍: |
用于黃柏中小檗堿的含量測定 |
方法原理: |
本品細粉加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在345nm處測定峰面積,外標法計算含量。 |
儀器設(shè)備及實驗條件: |
儀器設(shè)備 10A-VP 高效液相色譜儀:LC-10A Tvp 泵;SPD-M10Avp 二極管陣列檢測器(日本島津公司);CLASS-VP 色譜工作站(日本島津公司)。 色譜條件 色譜柱:Hypersil BDS C18 (150mm×416mm,5μm);美國THERMO 有限公司);流動相:乙腈-33mmol/L磷酸二氫鉀溶液-三乙胺(20∶72∶0.1,用磷酸調(diào)pH值為4.50);檢測波長:345nm;柱溫:25℃;流速:1.0ml/min。 |
試樣制備: |
對照品溶液的制備 準確稱取鹽酸小檗堿對照810mg,置100ml容量瓶中,加甲醇溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。 供試品溶液的制備 準確稱定黃柏藥材粉末0.5g,置于25ml容量瓶中,加甲醇25ml,超聲處理30min,放至室溫,加甲醇至刻度,用微孔濾膜(0.45μm)濾過,取續(xù)濾液,即得;測定樣品溶液的制備:按原處方中各味藥的比例,準確稱取黃柏2g、甘草2g、桑寄生2g,按以下各組方案進行配比試驗:黃柏單煎(Ⅰ),黃柏與甘草(Ⅱ),黃柏與桑寄生(Ⅲ),黃柏與甘草、桑寄生(Ⅳ),甘草與桑寄生(Ⅴ),即分別加10倍量水煎煮2 次,每次1.5h,合并煎液,濃縮,水浴蒸干,用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中,稀釋至刻度,精密吸取2ml,用5g堿性氧化鋁吸附,裝柱,并用50ml甲醇洗脫,收集洗脫液,水浴蒸干,再用甲醇溶解轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶,定容,用微孔濾膜(0.45μm) 濾過,取續(xù)濾液,即得。 |
操作步驟: |
在選定的色譜條件下,分別吸取對照品和供試品溶液各5μl進樣,測定峰面積值,按外標法計算含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻: |
李巧如,張鵬,陳世虎等. 黃柏與甘草及桑寄生共煎對小檗堿提取率影響的研究. 中國藥房. 2005,16(3):235~236 |