公開(公告)號 | CN1978632A |
公開(公告)日 | 2007.06.13 |
申請(專利)號 | CN200610123677.X |
申請日期 | 2006.11.21 |
專利名稱 | 重組畢赤酵母及其表達NGAL蛋白的方法 |
主分類號 | C12N1/19(2006.01)I |
分類號 | C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)N;C12R1/84(2006.01)N |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 李恩民;張丕顯;吳炳禮;杜則澎;許麗艷 |
地址 | 515031廣東省汕頭市新陵路22號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 廣州粵高專利代理有限公司 |
代理人 | 陳 衛(wèi) |
國省代碼 | 廣東;44 |
主權(quán)項 | 一種重組畢赤酵母,其特征在于由如下方法制備而成: (1)PCR擴增NGAL的cDNA; (2)PCR產(chǎn)物與載體pPIC9連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒pPIC9-NGAL; (3)重組質(zhì)粒pPIC9-NGAL轉(zhuǎn)化畢赤酵母,得到重組畢赤酵母。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及NGAL蛋白,公開了重組畢赤酵母及其表達NGAL蛋白的方法。本發(fā)明通過PCR擴增、連接、轉(zhuǎn)化與篩選,最終獲得高效表達NGAL蛋白的重組畢赤酵母菌株。該菌株能將目標蛋白分泌到培養(yǎng)基中,可達>100mg/L,而且無雜蛋白。這使得接續(xù)下來的純化工藝變得十分簡單:發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨沉淀、脫鹽、陽離子交換層析即可。所得蛋白優(yōu)于原核表達蛋白,糖基化完整,可用于人NGAL功能研究以及臨床NGAL檢測的標準蛋白。 |
國際公布 |