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從胸、腹水中提取游離mRNA的方法

公開(公告)號(hào) CN1952176A  
公開(公告)日 2007.04.25  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610096455.3  
申請(qǐng)日期 2006.09.27  
專利名稱 從胸、腹水中提取游離mRNA的方法  
主分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;C07H21/02(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 劉寶瑞;王立峰;錢曉萍  
地址 210008江蘇省南京市中山路321號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京中新達(dá)專利代理有限公司  
代理人  
國(guó)省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 從胸、腹水中提取游離mRNA的方法,其步驟在于: (1)將胸水或腹水注入有枸櫞酸鈉溶液的無(wú)RNA酶抗凝管中; (2)上離心機(jī)離心,吸取上清至新管,再離心,吸取三分之二上清至新管; (3)取上清加入到Trizol LS溶液中,室溫震蕩; (4)向其中加入氯仿,劇烈震蕩后室溫下放置; (5)上離心機(jī)離心,吸取水相層至新管; (6)加入異丙醇,沉淀RNA; (7)上離心機(jī)離心,75%乙醇洗滌后晾干; (8)加入無(wú)RNA酶水,溶解RNA,以其為模板,常規(guī)技術(shù)反轉(zhuǎn)錄為cDNA保存。  
摘要 本發(fā)明涉及一種從胸、腹水中提取游離mRNA的方法。本發(fā)明將胸或腹水注入有枸櫞酸鈉溶液的無(wú)RNA酶抗凝管中,離心,吸取上清,再離心,再吸取上清,上清加入到Trizol LS溶液中,室溫震蕩,加入氯仿,劇烈震蕩后室溫下放置,離心,吸取水相層至新管,加入異丙醇,沉淀RNA,離心,75%乙醇洗滌后晾干,加入無(wú)RNA酶水,溶解RNA,以其為模板,常規(guī)技術(shù)反轉(zhuǎn)錄為cDNA保存。解決了過(guò)去無(wú)法從胸、腹水中抽提RNA的缺陷,可以對(duì)腫瘤及其他疾病進(jìn)行早期診治。操作方便,重復(fù)性強(qiáng)。  
國(guó)際公布  
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