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長鏈型重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2及其制備方法和應用

公開(公告)號 CN1951964A  
公開(公告)日 2007.04.25  
申請(專利)號 CN200610118006.4  
申請日期 2006.11.06  
專利名稱 長鏈型重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2及其制備方法和應用  
主分類號 C07K14/51(2006.01)I  
分類號 C07K14/51(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;A61L27/54(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 上海瑞邦生物材料有限公司  
發(fā)明(設計)人 劉昌勝;林 俊;陳芳萍;曹雪華  
地址 200231上海市徐匯區(qū)華涇路1305弄17號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 中原信達知識產(chǎn)權代理有限責任公司  
代理人 羅大忱  
國省代碼 上海;31  
主權項 一種長鏈型重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2,其特征在于,是由人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2成熟肽的114個基酸和連接在所述的氨基酸的N端的氨基酸的多肽鏈構(gòu)成,所說的多肽鏈為Met Lys Arg His Asp Gly Lys Gly His Pro Leu His Lys Arg Glu Lys Arg,或以以上肽鏈為基礎的較短的多肽鏈。  
摘要 本發(fā)明公開了一種長鏈型重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2及其制備方法和應用。本發(fā)明利用基因工程技術在大腸桿菌、枯草芽孢桿菌等表達系統(tǒng)中制備長鏈型重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2。本發(fā)明以人骨肉瘤細胞mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA為模板,擴增出編碼羧基端自然結(jié)構(gòu)成熟肽完整114個氨基酸的核苷酸序列,并在正向引物5’端第一個密碼子之前增加一段核苷酸,使其對應的氨基酸序列在N端增加一段多肽,得到長鏈型rhBMP-2基因,分子量約為30KD,純度達95%以上。該長鏈型rhBMP-2具有活性高、體內(nèi)穩(wěn)定性好,利于重組蛋白的表達、復性和分離純化,利于活性蛋白在體內(nèi)的穩(wěn)定及活性的穩(wěn)定發(fā)揮,適合于骨缺損填充、融合植骨等,尤其適合于椎體融合、骨折延遲愈合、骨不連、大段骨缺損的填充修復。  
國際公布  
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