| 公開(公告)號(hào) | CN1298736C |
| 公開(公告)日 | 2007.02.07 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510012463.0 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.04.21 |
| 專利名稱 | 從牛胎盤分離純化免疫調(diào)節(jié)活性多肽的方法 |
| 主分類號(hào) | C07K2/00(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C07K2/00(2006.01)I;C07K14/00(2006.01)I;C07K14/47(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/20(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 石家莊三鹿集團(tuán)股份有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王玉良;生慶海;夏文水;房新平;魏 鵬;翟紅梅 |
| 地址 | 050071河北省石家莊市和平西路539號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 石家莊匯科專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 王 琪 |
| 國省代碼 | 河北;13 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 從牛胎盤分離純化免疫調(diào)節(jié)活性多肽的方法，其特征在于它是經(jīng)過如下步驟實(shí)現(xiàn)的： A、新鮮牛胎盤處理：清洗切塊，加兩倍(W/V)的pH6.8-7.4的磷酸鹽緩沖液勻漿，離心沉淀分離，上清液經(jīng)1萬分子量截留超濾、納濾脫鹽、冷凍干燥； B、陰離子交換層析 取30mg步驟A的凍干粉，溶于5ml pH 7.4的20mmol/LNa2HPO4-NaH2PO4緩沖液中，上樣到2.6×35cm的Sepharose CL-6B陰離子交換柱上，流速為1mL/min，淋洗液A液為20mmol/L的pH 6.8或7.2的Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液，B液為A液中加入1.0mol/L氯化鈉的溶液，梯度洗脫得到含有活性多肽的組分1a，梯度洗脫梯度方式為： 0-600min A液； 600-1000min B液0-100％； C、凝膠排阻層析：將步驟B收集到的組分1a直接上到1.0×75cm的Sephadex G-25柱上，流動(dòng)相為用20mmol/L，pH 6.8或7.2或7.4的Na2HPO4-NaH2PO4緩沖液，流速為10mL/h，等度洗脫，得到含有活性多肽的組分1b； D、反相高效液相層析：將步驟C收集到的組分1b直接上到Sephasil C18柱上，流速為1mL/min，流動(dòng)相為A液選用加入0.05％三氟乙酸的5-10％乙腈，B液選用加入0.05％三氟乙酸的40-60％的乙腈，梯度洗脫，得到含有活性多肽的組分4，梯度洗脫梯度方式為： 0-8min A液； 8-12min B液0-100％； 12-16min B液； E、對(duì)步驟D純化的組分4檢測(cè)，脫鹽、凍干即可。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提出將牛胎盤作為一類新的胎盤資源，清洗切塊、勻漿抽提、離心沉淀分離、上清液經(jīng)超濾、納濾脫鹽、冷凍干燥得到含有活性免疫調(diào)節(jié)活性多肽基礎(chǔ)產(chǎn)品；在經(jīng)過陰離子交換層析、凝膠排阻層析、反相高效液相層析幾步分離純化，透析凍干得到提純的成品。本發(fā)明與傳統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)因子的研究相比，明確了傳統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)因子中起活性功能的成分多肽，純化程度不同的免疫調(diào)節(jié)活性多肽能夠滿足不同行業(yè)的需求。離子交換層析和凝膠排阻層析后得到的免疫調(diào)節(jié)活性多肽為研制具有免疫調(diào)節(jié)活性的保健食品提供了豐富的原料。反相高效液相層析后得到的純度90％以上的免疫調(diào)節(jié)活性多肽，生物活性可達(dá)到藥用標(biāo)準(zhǔn)。 |
| 國際公布 |
