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一種pcrDNA疫苗及其制備方法和應(yīng)用

公開(公告)號 CN1850279A  
公開(公告)日 2006.10.25  
申請(專利)號 CN200610033861.5  
申請日期 2006.02.23  
專利名稱 一種pcrDNA疫苗及其制備方法和應(yīng)用  
主分類號 A61K48/00(2006.01)I  
分類號 A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61P43/00(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所  
發(fā)明(設(shè)計)人 宋長緒;張洪利;王建龍;黃 忠;蔣智勇  
地址 510640廣東省廣州市天河區(qū)五山  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 廣州市華學(xué)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司  
代理人 裘 暉  
國省代碼 廣東;44  
主權(quán)項 一種pcrDNA疫苗的制備方法,包括如下步驟: (1)通用載體pcrDNAV或通用載體pcrDNAV-T的構(gòu)建:將擴增出的真核生物基因轉(zhuǎn)錄啟動子和擴增出的真核生物基因轉(zhuǎn)錄終止信號序列分別克隆至克隆載體中,并保留克隆載體的多克隆位點,獲得通用載體,該通用載體命名為pcrDNAV;或由pcrDNAV進一步制備通用載體T載體,命名為pcrDNAV-T; (2)通用載體pcrDNAV或pcrDNAV-T的通用引物的設(shè)計:分別在通用載體pcrDNAV或pcrDNAV-T上的真核生物基因轉(zhuǎn)錄啟動子的上游和真核生物基因轉(zhuǎn)錄終止信號序列的下游設(shè)計通用引物,通用引物擴增后pcr產(chǎn)物包含完整的基因表達元件盒; (3)含有目的基因的重組pcrDNA疫苗通用載體的構(gòu)建:將目的基因按基因克隆的方法克隆入pcrDNAV或pcrDNAV-T載體的多克隆位點中,獲得含有目的基因的重組質(zhì)粒pcrDNAV-Target或pcrDNAV-T-Target; (4)pcrDNA疫苗的擴增:以pcrDNAV-Target或pcrDNAV-T-Target為模板,通用引物為引物,采用PCR擴增出完整的含有目的基因的基因表達元件盒即含有完整基因表達盒的線性DNA片段,所述線性DNA片段即為pcrDNA疫苗。  
摘要 本發(fā)明公開了一種新型DNA疫苗——pcrDNA疫苗的制備原理和技術(shù)。pcrDNA疫苗是將攜帶有完整的基因表達元件的PCR產(chǎn)物直接作為DNA疫苗,該DNA疫苗不攜帶任何目的基因以外的無關(guān)基因或核酸序列,具有更好生物安全性;單位質(zhì)量內(nèi)具有更高的效價;該疫苗刺激產(chǎn)生的抗體較用質(zhì)粒制備的DNA疫苗產(chǎn)生抗體更快;采用PCR技術(shù)制備DNA疫苗,工藝簡單,便于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明還公開了上述pcrDNA疫苗在人和動物中的應(yīng)用,pcrDNA疫苗免疫人和動物,可以起到預(yù)防和治療人和動物的疾病如傳染病、寄生蟲病、腫瘤、營養(yǎng)代謝病及基因缺陷性疾病等及其他應(yīng)用目的。  
國際公布  
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