| 公開(公告)號 | CN1814800A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.09 |
| 申請(專利)號 | CN200510090185.0 |
| 申請日期 | 2005.12.16 |
| 專利名稱 | 一種用于制備HIV-1病毒載量測定外參照的質(zhì)粒及其應(yīng)用 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 李衛(wèi)云;李燕琴 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 任若通;賁昆龍;李衛(wèi)云;陳 韻;陳震球;陶 劍 |
| 地址 | 510623廣東省廣州市珠江新城南天廣場皇朝閣1005 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項 | 一種用于制備HIV-1病毒測定的RNA外參照的重組質(zhì)粒載體，其包含用引物F/R以HIV-1基因組RNA為模板反轉(zhuǎn)錄擴增而獲得的核酸片段，其中所述引物F/R序列如下： F：5’-CGACTCATGGAGCATCCTGCCTAAG-3’， R：5’-ACAGCGGTCACTTGACGAGTAATCACTAGC-3’。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種用于制備HIV-1病毒量測定用外參照的質(zhì)粒，建立HIV-1感染者和艾滋病人血漿中HIV病毒量定量測定用外參照的方法以及該外參照在HIV病毒量測定中的應(yīng)用。其制備方法為：利用HIV外圍引物HF/HR從HIV-1IIIB病毒的RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈式反應(yīng)(RT-PCR)得到的HIV-1cDNA片斷，克隆到載體以構(gòu)建含有HIV-1cDNA片斷的pZhcT-550重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受態(tài)細胞，經(jīng)PCR鑒定，篩選出陽性克隆子，獲得大量重組質(zhì)粒pZhcT-550。體外轉(zhuǎn)錄重組質(zhì)粒pZhcT-550，獲得供HIV病毒載量定量測定使用的RNA外參照，然后在熒光定量PCR儀上通過HIV LUX引物的配合使用，建立了HIV感染者和艾滋病患者血漿中HIV病毒載量的定量測定方法。本發(fā)明操作簡單，價格便宜，特異性好，靈敏度高，并有較好的可重復(fù)性，將為艾滋病的科學研究與防治提供有力工具。 |
| 國際公布 |
