| 公開(公告)號 | CN1782075A |
| 公開(公告)日 | 2006.06.07 |
| 申請(專利)號 | CN200410073166.2 |
| 申請日期 | 2004.10.11 |
| 專利名稱 | 基因工程重組二連體骨形成蛋白的設(shè)計構(gòu)建方法 |
| 主分類號 | C12N15/11(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/11(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 陳蘇民;梁克明;秦 云;陳南春 |
| 地址 | 710049陜西省西安市長樂西路15號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 孫 楓 |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權(quán)項 | 基因工程重組二連體骨形成蛋白的設(shè)計構(gòu)建方法，其特征在于：用基因工程手段，將2個BMP成熟肽間的雙硫鍵(-S-S-)改為以肽鍵(-CO-NH-)相連接，即將編碼BMP成熟肽截短或?qū)⒏痰腂MP肽段的cDNA放在大腸桿菌中表達，使BMP成熟肽在內(nèi)部正確形成3對雙硫健，在BMP成熟肽的鏈間以肽健相連接而成為BMP二連體以及經(jīng)在體外純化、復(fù)性后折疊成為有活性的BMP。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及基因工程重組二連體骨形成蛋白的設(shè)計構(gòu)建方法，其特征是用基因工程手段構(gòu)建“重組人BMP成熟肽二連體”，基本方法是將編碼BMP成熟肽的cDNA放在大腸桿菌中表達，使BMP成熟肽在內(nèi)部正確形成3對雙硫鍵，在BMP成熟肽的鏈間以肽鍵相連接而成為BMP二連體以及經(jīng)在體外純化復(fù)性后折疊成為有活性的BMP；半胱氨酸突變的過程需要加入限制性核酸內(nèi)切酶位點序列和起始碼，并需要PCR的擴增引物；引物根據(jù)需要可設(shè)計為不同DNA序列；本發(fā)明提供了用基因工程的手段使大腸桿菌直接表達類似二聚體結(jié)構(gòu)的有活性的重組二連體骨形成蛋白及其制備方法，以期用廉價的大腸桿菌基因工程系統(tǒng)去大量生產(chǎn)具有良好生物活性的各種BMP。 |
| 國際公布 |
