| 公開(公告)號 | CN1282741C |
| 公開(公告)日 | 2006.11.01 |
| 申請(專利)號 | CN96113219.1 |
| 申請日期 | 1996.08.25 |
| 專利名稱 | 核酸擴增方法 |
| 主分類號 | C12N9/00(2006.01)I |
| 分類號 | C12N9/00(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/25(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1995.8.25 US 002673 |
| 申請(專利權(quán))人 | 霍夫曼-拉羅奇有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 戴維·E·伯奇;沃爾特·J·萊爾德;邁克爾·A·佐科利 |
| 地址 | 瑞士巴塞爾 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京市柳沈律師事務(wù)所 |
| 代理人 | 巫肖南 |
| 國省代碼 | 瑞士;CH |
| 主權(quán)項 | 一種可逆失活的通過化學修飾的熱穩(wěn)定性酶，它由具有DNA聚合酶活性或連接酶活性的熱穩(wěn)定性酶與能使所述酶活性可逆失活的修飾試劑所形成的混合物反應而產(chǎn)生，其中所述反應是在堿性pH中在低于約25℃的溫度中進行，所述試劑是具有下列通式的二羧酸酐其中R1和R2是氫或有機基，它們可以相連，或者所述試劑是具有下列通式的二羧酸酐其中R1和R2是有機基，它們可以相連，且氫是順式，所述反應導致酶活性基本上完全失活。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了由化學修飾而可逆失活的熱穩(wěn)定性酶，其特征在于，該化學修飾的熱穩(wěn)定性酶在溫度低于約25℃時呈堿性pH的緩中水液中溫育，導致酶活性在少于約20分鐘內(nèi)酶活性無明顯增加，且其中所說的化學修飾的酶在配成25℃下約pH 8-9的緩沖水液中在大于約50℃的溫度下溫育，導致酶活性在少于約20分鐘內(nèi)酶活性至少增加兩倍。該化學修飾的熱穩(wěn)定性酶可以用于擴增核酸，該失活酶的活性通過在擴增反應前或作為擴增反應的部分在增高的溫度下溫育反應混合物而恢復。 |
| 國際公布 |
