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弓形蟲蟲體、風(fēng)疹、巨細(xì)胞、皰疹Ⅰ、Ⅱ病毒抗原純化工藝

公開(公告)號 CN1241641C  
公開(公告)日 2006.02.15  
申請(專利)號 CN01115286.9  
申請日期 2001.06.01  
專利名稱 弓形蟲蟲體、風(fēng)疹、巨細(xì)胞、皰疹Ⅰ、Ⅱ病毒抗原純化工藝  
主分類號 A61K39/12(2006.01)I  
分類號 A61K39/12(2006.01)I;G01N33/531(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 李克生  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李克生;杜惠芬  
地址 730050甘肅省蘭州市小西湖東街24號704室  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 蘭州中科華西專利代理有限公司  
代理人 王玉雙  
國省代碼 甘肅;62  
主權(quán)項(xiàng) 一種TORCH抗原純化工藝,其特征在于含有下述步驟;(1)將風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒I型、II型的培養(yǎng)液,經(jīng)離心去除細(xì)胞碎渣后,沉淀離心分離得病毒沉淀物:(2)將弓形蟲腹水離心去除細(xì)胞,然后加入的0.01mol、PH=7的磷酸鹽緩沖液稀釋,離心后弓形蟲腹水與緩沖液的體積比為1∶(0.8-1.3),再沉淀后離心分離得弓形蟲病毒沉淀物;(3)將上述(1)、(2)兩步沉淀所取得的病毒生成物分別溶于0.01mol、PH=8.0的Tris-HCl-0.001molEDTA的緩沖液中:然后再將溶解液采用透析得病毒濃縮液;(4)將病毒濃縮液用離子交換柱進(jìn)行分離并用0.01mol、PH=8.0的Tris-HCI-0.001molEDTA緩沖液含0.2-0.5mol的NaCl作梯度洗脫,收集各蛋白峰,包被酶標(biāo)板,并用已知陽性血清,做間接ELISA試驗(yàn)檢測抗原活性高峰液收集,即為純化TORCH抗原。  
摘要 本發(fā)明涉及一種TORCH抗原純化工藝,該工藝是將風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒培養(yǎng)液離心分離后和弓形蟲腹水經(jīng)離心分離再稀釋的蟲體液進(jìn)行沉淀分離得沉淀物,再將沉淀物溶解,然后經(jīng)透析得濃縮病毒液和弓形蟲提取濃縮液,將濃縮液過DEAE類陰離子交換柱,收集各蛋白峰,包被酶標(biāo)板,并用已知陽性血清做間接ELISA試驗(yàn)檢測抗原活性高峰液收集,即為純化TORCH;本發(fā)明的工藝收率高可達(dá)80%以上、生產(chǎn)的抗原純度高、工藝簡便,可批量生產(chǎn)、批間差異小、一個批次可生產(chǎn)100萬人份以上的抗原。  
國際公布  
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