減毒水痘-帶狀皰診病毒在制備用于預防水痘的藥物中的應用
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公開(公告)號
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CN1227031C
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公開(公告)日
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2005.11.16
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申請(專利)號
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CN00133104.3
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申請日期
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1993.06.03
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專利名稱
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減毒水痘-帶狀皰診病毒在制備用于預防水痘的藥物中的應用
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主分類號
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A61K39/25
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分類號
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A61K39/25;C12N7/00
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分案原申請?zhí)? |
93106673.5
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優(yōu)先權
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1992.6.4 US 893295;1992.6.4 US 894039
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申請(專利權)人
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麥克公司
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發(fā)明(設計)人
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P·J·普羅沃斯特;D·L·克拉;P·A·弗里曼
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地址
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美國新澤西州
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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中國專利代理(香港)有限公司
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代理人
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譚明勝
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國省代碼
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美國;US
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主權項
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減毒水痘-帶狀皰疹病毒在制備用于預防水痘的藥物中的應用，其中水痘-帶狀皰疹病毒縮寫為VZV，所述減毒病毒是用如下方法制備的：a.培養(yǎng)選自人二倍體細胞的VZV易感染細胞，使之匯合成單層培養(yǎng)物，并供給不能脂代謝的二糖；b.在接近匯合點時，感染步驟a培養(yǎng)的細胞，得到高感染復數(shù)的VZV感染細胞；c.將VZV感染培養(yǎng)物在高營養(yǎng)狀態(tài)下維持22-96小時，并在感染性VZV產量達到峰值時收集；d.在收集VZV感染細胞前，用含有或不含有溶酶體營養(yǎng)劑的生理溶液洗滌VZV感染培養(yǎng)物；e.將VZV感染細胞收集到穩(wěn)定溶液中，并且或者立即破碎細胞，或者冷凍這些細胞供以后破碎；f.破碎VZV感染細胞以釋放細胞結合的VZV，并除去細胞碎片，以提供無細胞VZV制備物；其中VZV易感染細胞是MRC-5細胞，減毒VZV是水痘-帶狀皰疹病毒的Oka株，培養(yǎng)溫度是在30-37℃之間，二糖是以20-60mM提供的蔗糖，感染復數(shù)是1∶25和1∶625之間，溶酶體營養(yǎng)劑是以20-50mM提供的氯化銨或以230μM提供的氯喹。
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摘要
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以較高的VZV產量制備活的減毒水痘-帶狀皰疹病毒疫苗。該新方法使活VZV疫苗的大量制備更為實用。另外，最佳單層細胞培養(yǎng)條件提供了一種提高單層細胞密度的方法，該方法可用于提高病毒疫苗的產量。根據(jù)該方法，在常規(guī)培養(yǎng)容器中通常獲得接近500，000個細胞/cm2的細胞密度。
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國際公布
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