| 公開(公告)號 | CN1665838A |
| 公開(公告)日 | 2005.09.07 |
| 申請(專利)號 | CN03816241.5 |
| 申請日期 | 2003.07.03 |
| 專利名稱 | 在蛋白質(zhì)如病原性/傳染性蛋白質(zhì)中誘導(dǎo)構(gòu)象轉(zhuǎn)變的方法 |
| 主分類號 | C07K14/47 |
| 分類號 | C07K14/47;G01N33/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2002.7.11 US 60/395,203 |
| 申請(專利權(quán))人 | 瑞士聯(lián)邦蘇黎世技術(shù)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | R·扎恩;T·呂爾斯 |
| 地址 | 瑞士蘇黎世 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | PCT/EP2003/007077 2003.7.3 |
| 進入國家日期 | 2005.01.10 |
| 專利代理機構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 曹雯;劉玥 |
| 國省代碼 | 瑞士;CH |
| 主權(quán)項 | 一種在重組蛋白質(zhì)和/或其變體中誘導(dǎo)構(gòu)象轉(zhuǎn)變的體外方法，其中所述的構(gòu)象轉(zhuǎn)變導(dǎo)致β折疊二級結(jié)構(gòu)含量的增加，該方法包括步驟：a)提供一種轉(zhuǎn)變緩沖液；b)向轉(zhuǎn)變緩沖液中加入含有帶負電荷脂質(zhì)的層狀脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的溶液；c)向轉(zhuǎn)變緩沖液中加入重組的蛋白質(zhì)分子和/或其變體；d)由轉(zhuǎn)變緩沖液、添加的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)分子形成一種樣品混合物；e)在樣品混合物中確定轉(zhuǎn)變溫度；和將步驟d)的樣品混合物置于根據(jù)步驟e)的轉(zhuǎn)變溫度下足夠的時間以形成構(gòu)象轉(zhuǎn)變的蛋白質(zhì)；其中形成層狀脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和構(gòu)象轉(zhuǎn)變的蛋白質(zhì)的水溶性復(fù)合物，構(gòu)象轉(zhuǎn)變的蛋白質(zhì)為寡聚的β折疊中間態(tài)結(jié)構(gòu)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種在蛋白質(zhì)中誘導(dǎo)構(gòu)象轉(zhuǎn)變的體外方法，而所述構(gòu)象轉(zhuǎn)變導(dǎo)致β折疊二級結(jié)構(gòu)的含量升高，該方法包括步驟：a)提供一種轉(zhuǎn)變緩沖液；b)向轉(zhuǎn)變緩沖液中加入含有帶負電荷脂質(zhì)的層狀脂質(zhì)結(jié)構(gòu)的溶液；c)向轉(zhuǎn)變緩沖液中加入蛋白質(zhì)分子；d)由轉(zhuǎn)變緩沖液、添加的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)分子形成一種樣品混合物；e)在樣品混合物中確定轉(zhuǎn)變溫度；和f)將步驟d)的樣品混合物置于根據(jù)步驟e)的轉(zhuǎn)變溫度下足夠的時間以形成構(gòu)象轉(zhuǎn)變的蛋白質(zhì)。通過這一方法，形成了層狀脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和構(gòu)象轉(zhuǎn)變蛋白質(zhì)的水溶性復(fù)合物，所述構(gòu)象轉(zhuǎn)變的蛋白質(zhì)為寡聚的β折疊中間型結(jié)構(gòu)�？梢酝ㄟ^有效地破壞層狀脂質(zhì)結(jié)構(gòu)由層狀脂質(zhì)結(jié)構(gòu)和寡聚的β折疊中間型結(jié)構(gòu)的水溶性復(fù)合物產(chǎn)生淀粉樣聚集物。這類蛋白質(zhì)可能涉及神經(jīng)變性疾病像傳播性海綿狀腦病(TSE)、阿爾茨海默癥、多發(fā)性硬化癥和帕金森病。說明書包括通過該方法生產(chǎn)的蛋白質(zhì)的應(yīng)用，例如，開發(fā)PrPC向PrPSc轉(zhuǎn)變的不同相；開發(fā)新的用于診斷的TSE檢測方法以及抗TSE如人克-雅氏病的潛在的治療方法和預(yù)防方法。 |
| 國際公布 | WO2004/007545 英 2004.1.22 |
