公開(公告)號
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CN1554749A
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公開(公告)日
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2004.12.15
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申請(專利)號
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CN200310117515.1
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申請日期
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2003.12.25
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專利名稱
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表達傳染性囊病病毒VP2蛋白的重組T4噬菌體的構(gòu)建及其應(yīng)用
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主分類號
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C12N7/01
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分類號
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C12N7/01;C12N15/40;C12N15/73;A61K39/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計)人
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曹永長;畢英佐;史泉城;馬靜云
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地址
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510642廣東省廣州市天河區(qū)五山華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項
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含有傳染性囊病病毒VP2蛋白的重組T4噬菌體的構(gòu)建方法,其特征在采用基因重組的方法獲得的,其方法是:用EcoRI在37℃分別消化vp2基因的PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒pR,接著在T4連接酶的作用之下,連接消化的vp2的PCR產(chǎn)物和質(zhì)粒pR,用連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,經(jīng)Ampr抗性篩選,獲得插入了vp2基因的重組子,然后用1對特異性引物SOC-S/VP2-A進行PCR篩選;對PCR篩選陽性的細菌,挑取單菌落接種于3mLLA培養(yǎng)基中,37℃,200r/m振搖培養(yǎng)16-20小時,抽提質(zhì)粒,再經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化和序列測定,獲得含有傳染性囊病病毒vp2基因的重組整合質(zhì)粒pR-VP2;用重組整合質(zhì)粒pR-VP2和缺陷性T4噬菌體T4-Z1進行同源重組,獲得表達VP2蛋白的重組T4噬菌體。
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摘要
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本發(fā)明提供了一個表達雞傳染性囊病病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP2的重組T4噬菌體,該重組T4噬菌體具有傳染性囊病病毒VP2基因的核苷酸序列和VP2蛋白的氨基酸殘基序列。本發(fā)明還涉及重組T4噬菌體在傳染性囊病疫苗免疫和傳染性囊病病毒抗體檢測中的應(yīng)用。
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國際公布
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