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公開(公告)號
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CN1544466A
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公開(公告)日
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2004.11.10
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申請(專利)號
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CN200310105919.9
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申請日期
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2003.11.13
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專利名稱
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高親和力抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因及其制備
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主分類號
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C07K14/525
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分類號
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C07K14/525;C07K16/18;C07H21/04;C12P19/34;C12P21/08
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學
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發(fā)明(設計)人
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金伯泉;劉雪松;朱參勝;楊琨
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地址
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710032陜西省西安市長樂西路17號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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西安通大專利代理有限責任公司
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代理人
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李鄭建
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國省代碼
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陜西;61
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主權項
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一種高親和力抗腫瘤壞死因子單克隆抗體的可變區(qū)基因，其特征在于，包括F6VL和F6VH基因序列和氨基酸序列分別為：F6VL基因序列和氨基酸序列包括CDR1、CDR2和CDR3核苷酸序列和氨基酸序列如下：10ctgacccagtctccatcctccctggctatgtcagtaggacagaagLTQSPSSLAMSVGQK55gtcactatgaactgcaagtccagtcagagccttttaaatagttacVTMNCKSSQSLLNSY100actcagaagaactatttggcctggtaccagcagaaaccaggacagTQKNYLAWYQQKPGQ145tctcctaaacttctggtatactttgcatccactagggagtctgggSPKLLVYFASTRESG190gtccctgatcgcttcatgggcagtggatctgggacagatttcactVPDRFMGSGSGTDFT235cttaccatcagcagtgtgcagactgaagacctggcagattacttcLTISSVQTEDLADYF280tgtcagcaacattataggattccattcacgttcggctcggggaccCQQHYRIPFTFGSGT325aagctggagatctaa339KLEI*CDR1：aagtccagtcagagccttttaaatagttacactcagaagaactatttggccKSSQSLLNSYTQKNYLACDR2：tttgcatccactagggagtctFASTRESCDR3：cagcaacattataggattccattcacgQQHYRIPFTF6VH基因序列和氨基酸序列包括CDR1、CDR2和CDR3核苷酸序列和氨基酸序列如下：9ctgcaggagtcaggacctggcctcgtgaaaccttctcagtctctgLQESGPGLVKPSQSL54tctctcacctgctctgtctctggctactccatcaccagtggttatSLTCSVSGYSITSGY99ttctggaactggatccggcagttttcaggaaacaaattggaatggFWNWIRQFSGNKLEW144atgggctacataagctacgacggtagcaataactacaacccatctMGYISYDGSNNYNPS189ctcaaaaatcgaatctccatcactcgtgacacatctaagaaccagLKNRISITRDTSKNQ234tttttcctgaagttgaattctgtgactcctgaggacacagctacaFFLKLNSVTPEDTAT279tattactgtgcaagagatggtgactactactttgactactggggcYYCARDGDYYFDYWG324caagggaccacggtcaccgtctcctca350QGTTVTVSSCDR1：agtggttatttctggaacSGYFWNCDR2：tacataagctacgacggtagcaataactacaacccatctGtcaaaaatYISYDGSNNYNPSLKNCDR3：gatggtgactactactttgactacDGDYYFDY
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摘要
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本發(fā)明公開了一種高親和力抗腫瘤壞死因子(TNF)單克隆抗體(F6 mAb)的可變區(qū)基因的制備方法。用重組人TNF免疫BALB/c小鼠，制備一組小鼠抗人TNF單克隆抗體。應用間接ELISA方法篩選出高親和力的F6 mAb。體外阻斷實驗證實，F(xiàn)6 mAb具有較高中和活性�？寺≡搯慰寺】贵w輕鏈和重鏈可變區(qū)基因，獲得該單克隆抗體輕鏈和重鏈可變區(qū)基因序列和氨基酸序列，確認該基因序列和蛋白序列的唯一性。編碼該可變區(qū)的基因序列在構建對炎癥、自身免疫性疾病等有治療作用的嵌合抗體和人源化抗體等方面有巨大的潛在價值。高親和力F6 mAb可制備測定體液中TNF的ELISA試劑盒，在炎癥、自身免疫性疾病的診斷方面有廣泛的應用價值。另外，高親和力F6 mAb可用于制備純化重組TNF的親和層析柱。
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國際公布
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