公開(公告)號
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CN1169949C
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公開(公告)日
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2004.10.06
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申請(專利)號
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CN01144628.5
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申請日期
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2001.12.21
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專利名稱
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一種缺失E1A編碼序列的重組腺病毒構(gòu)建體的獲得及用途
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主分類號
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C12N7/01
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分類號
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C12N7/01;A61K48/00;A61P35/00;//C12N7/01,C12R1:93
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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深圳市天達康基因工程有限公司
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發(fā)明(設計)人
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周劍鋒;馬丁;盧運萍;王世宣
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地址
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518057 廣東省深圳市高新區(qū)南區(qū)市高新技術工業(yè)村R3棟B座710室
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項
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一種重組腺病毒構(gòu)建體,其特征在于該重組腺病毒構(gòu)建體缺失了人類5型腺病毒E1A蛋白的全部編碼區(qū),其序列位于382-1630nt,E1A蛋白編碼功能喪失,除此之外,包含人類5型腺病毒的全部基因組序列。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種在人類5型腺病毒(Human adenovirus type5)的基因組中定點缺失(delete)E1A編碼序列的構(gòu)建方案,以及獲得的重組腺病毒構(gòu)建體在腫瘤治療、診斷中的具體用途。用定點突變、PCR擴增、酶切、連接、亞克隆、轉(zhuǎn)染、重組腺病毒單克隆純化等技術,缺失E1A(382-1630nt)序列,篩選出不能表達E1A功能蛋白的重組腺病毒構(gòu)建體。該構(gòu)建體能選擇性地在腫瘤細胞內(nèi)復制增殖,從而特異性裂解殺滅腫瘤細胞,并對順鉑等一線化療藥物對腫瘤細胞的殺滅有顯著的增效效應,另一方面該重組腺病毒構(gòu)建體在正常細胞內(nèi)不能復制增殖,因而對正常細胞無毒性效應。該重組腺病毒構(gòu)建體在用于腫瘤治療藥物、診斷試劑的制備中具有良好的實用價值,同時也是一種良好的基因治療載體。
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國際公布
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