| 公開(公告)號 | CN1159456C |
| 公開(公告)日 | 2004.07.28 |
| 申請(專利)號 | CN00116541.0 |
| 申請日期 | 2000.06.15 |
| 專利名稱 | 篩選基因變異和蛋白質結合的DNA片段的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68;C12N15/10 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 上海交通大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 劉建華;林志新;王慶康;劉燕剛 |
| 地址 | 200030 上海市華山路1954號 |
| 頒證日 | 2004.07.28 |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海交達專利事務所 |
| 代理人 | 王錫麟 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種篩選基因變異和蛋白質結合的DNA片段的方法，主要包括制備DNA片段的方法，檢測與蛋白質結合的DNA片段的方法和鑒定基因變異的方法，其特征在于檢測蛋白質結合DNA片段的方法如下：基因組DNA用限制性內切酶酶切或用特異性的引物進行的PCR擴增制備出包含整個基因組的DNA片段，用特異性基團修飾這些DNA片段的末端，使之能夠與相應的固相載體表面進行共價交聯(lián)，用微陣列點樣設備將各種DNA片段點樣于固相載體表面并共價交聯(lián)之，制備成DNA芯片，用這種DNA芯片篩選蛋白質結合的DNA片段的方法是(a)將DNA芯片直接與熒光標記的蛋白質保溫，芯片的熒光信號位點表示蛋白質所結合的DNA片段；或(b)將DNA片段直接與蛋白質保溫，然后用DNase酶切，用同位素或熒光基團標記被保護的DNA片段，最后與DNA芯片雜交；或者將被保護的DNA片段直接與DNA芯片雜交，再用DNA連接酶或RNA連接酶或DNA聚合酶酶促反應標記與芯片雜交的DNA片段，芯片上的同位素信號或熒光信號表示與蛋白質結合的DNA片段。 |
| 摘要 | 本發(fā)明主要包括制備DNA片段、檢測與蛋白質結合的DNA片段和鑒定基因變異的方法。檢測蛋白質結合DNA片段的方法：基因組DNA用內切酶酶切或用引物進行的PCR擴增制備出片段，用基團修飾這些DNA片段的末端，使與相應的固相載體表面進行共價交聯(lián)，用微陣列點樣設備將各種DNA片段點樣于固相載體表面并共價交聯(lián)之，制備成DNA芯片，用這種DNA芯片篩選蛋白質結合的DNA片段的方法。 |
| 國際公布 |
