| 公開(公告)號 | CN1511957A |
| 公開(公告)日 | 2004.07.14 |
| 申請(專利)號 | CN02159415.5 |
| 申請日期 | 2002.12.31 |
| 專利名稱 | 一種基于芯片的反義寡核苷酸篩選方法及其用途 |
| 主分類號 | C12Q1/68 |
| 分類號 | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王升啟;劉韌;陳忠斌;王丹;;孫偶軍;李慎菁 |
| 地址 | 100850北京市太平路27號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 本發(fā)明涉及一種新的基于芯片雜交和原位RNase H切割的反義寡核苷酸篩選方法，其特征在于，通過將合成并修飾的靶向特定基因的寡核苷酸固定于化學(xué)修飾的固相載體上制備成基因芯片，與放射性同位素或非放射性分子標(biāo)記的信使核糖核酸(mRNA)模板進(jìn)行雜交，雜交結(jié)束后洗去雜交液并晾干，加入RNase H進(jìn)行切割，對照區(qū)只加緩沖液不加酶，一定時(shí)間后洗滌、晾干并進(jìn)行信號檢測掃描，分析各序列結(jié)合靶mRNA強(qiáng)度及RNase H切割活性，以RNase H切割前/切割后的比值進(jìn)行排序，理論上比值越大的序列其結(jié)合活性和RNase H切割活性越好，從而優(yōu)化出具有RNase H激活活性的結(jié)合靶點(diǎn)序列、最佳寡核苷酸長度及其修飾方法。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種生物工程類檢測技術(shù)及其用途。具體說是將合成并修飾的靶向特定基因的寡核苷酸固定于化學(xué)修飾的固相載體上制備成基因芯片，與放射性同位素或非放射性分子標(biāo)記的信使核糖核酸(mRNA)模板雜交，雜交結(jié)束后洗去雜交液并晾干，加入RNase H切割，對照區(qū)只加緩沖液不加酶，一定時(shí)間后洗滌、晾干并進(jìn)行檢測，分析各序列結(jié)合強(qiáng)度及RNase H切割活性，以RNase H切割前/切割后的比值進(jìn)行排序，理論上比值越大的序列其結(jié)合活性和RNase H切割活性越好，優(yōu)化出具有RNase H激活活性的結(jié)合靶點(diǎn)序列、最佳寡核苷酸長度及其修飾方法。從上述優(yōu)化的序列中選出最佳寡核苷酸序列，(1)通過體內(nèi)外活性評價(jià)進(jìn)一步確定其生物活性，獲得寡核苷酸候選藥物；(2)作為疾病診斷的探針；(3)作為基因功能研究的工具。 |
| 國際公布 |
