公開(公告)號(hào)
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CN1500151A
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公開(公告)日
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2004.05.26
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN02807671.0
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申請(qǐng)日期
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2002.03.04
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專利名稱
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PCR方法
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主分類號(hào)
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C12Q1/68
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分類號(hào)
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C12Q1/68;C12P19/34
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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2001.3.2 US 60/273,277
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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匹茲堡大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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托尼·E·戈德弗里;;詹姆斯·D·盧克蒂奇;西瓦·拉杰;;洛瑞·A·凱利;;西德內(nèi)·D·芬凱利斯特因
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地址
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美國(guó)賓夕法尼亞州
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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PCT/US2002/006504 2002.3.4
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進(jìn)入國(guó)家日期
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2003.09.29
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專利代理機(jī)構(gòu)
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永新專利商標(biāo)代理有限公司
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代理人
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過曉東
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國(guó)省代碼
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美國(guó);US
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主權(quán)項(xiàng)
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一種多重PCR反應(yīng)的方法,包括在PCR反應(yīng)混合物中,在DNA樣品上進(jìn)行PCR擴(kuò)增的步驟,潛在PCR擴(kuò)增是在開始的擴(kuò)增時(shí)期和第二個(gè)擴(kuò)增時(shí)期進(jìn)行的,各個(gè)擴(kuò)增時(shí)期包括一個(gè)或多個(gè)PCR循環(huán),各個(gè)PCR循環(huán)包括變性步驟,退火步驟和延長(zhǎng)步驟,這些步驟可以在與退火步驟相同的溫度下進(jìn)行,其中第二個(gè)擴(kuò)增時(shí)期的PCR擴(kuò)增是在與第一個(gè)擴(kuò)增時(shí)期不同的反應(yīng)條件下進(jìn)行的,可以調(diào)節(jié)第一個(gè)引物套的第一個(gè)擴(kuò)增子和第二個(gè)引物套的第二個(gè)擴(kuò)增子在第一個(gè)和第二個(gè)擴(kuò)增時(shí)期的生產(chǎn)。
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摘要
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提供了平衡的增倍PCR方法的方法。在該方法中,當(dāng)在第一和第二個(gè)擴(kuò)增時(shí)期當(dāng)引物的或選物限制地調(diào)節(jié)第一個(gè)引物套的第一個(gè)擴(kuò)增子和第二個(gè)引物套的第二個(gè)擴(kuò)增子生成的相對(duì)速度時(shí),在單個(gè)試管中利用兩個(gè)或多個(gè)成順序的暫時(shí)PCR時(shí)期有效地分開兩個(gè)或多個(gè)PCR反應(yīng)。同時(shí)提供了在手術(shù)內(nèi)診斷和預(yù)后中發(fā)現(xiàn)特殊用途的快速RT-PCR方法,例如通過確定在崗哨淋巴結(jié)中的瘤胚抗原(CEA)的表達(dá)水平,在診斷惡性食管腺癌中發(fā)現(xiàn)的。
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國(guó)際公布
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WO02/070751 英 2002.9.12
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