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用基因工程方法生產(chǎn)紅細(xì)胞刺激因子/粒細(xì)胞集落刺激因子融合蛋白

公開(公告)號(hào) CN1150327C  
公開(公告)日 2004.05.19  
申請(專利)號(hào) CN01104266.4  
申請日期 2001.02.27  
專利名稱 用基因工程方法生產(chǎn)紅細(xì)胞刺激因子/粒細(xì)胞集落刺激因子融合蛋白  
主分類號(hào) C12N15/62  
分類號(hào) C12N15/62;C12N15/63;C07K14/435;C07K19/00;C12P21/02  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 李欣越  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李洪興  
地址 130042 吉林省長春市北安路南二胡同103棟304  
頒證日 2004.05.19  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海智信專利代理有限公司  
代理人 高存秀  
國省代碼 吉林;22  
主權(quán)項(xiàng) 一種用基因工程方法生產(chǎn)紅細(xì)胞刺激因子/粒細(xì)胞集落刺激因子融合蛋白,其特征在于:該EPO/G-CSF融合蛋白具有EPO和G-CSF蛋白自然順序,并具有雙重活性,其EPO的生物活性為1×105U/mg;和其G-CSF的生物活性為1×107U/mg;其結(jié)構(gòu)為通過一連接片段把紅細(xì)胞生長因子與粒細(xì)胞集落刺激因子連接起來,結(jié)構(gòu)如下:紅細(xì)胞生長因子—連接片段一粒細(xì)胞集落刺激因子EPO———————LINKER———————G-CSF或 G-CSF———LINKER————EPO和具有EPO/G-CSF融合蛋白一級結(jié)構(gòu)如下:APPRLICDSRVLERYLLEAKEAENITTGCAEHCSLNENITVPDTKVNFYAWKRMEVGQQAVEVWQGLALLSEAVLRGQALLVNSSQPWEPLQLHVDKAVSGLRSLTTLLRALRAQKEAISPPDAASAAPLRTITADTFRKLFRVYSNFLRGKLKLYTGEACRTGDRGGSGGGSAAGGSGGTPLGPASSLPQSFLLKCLEQVRKIQGDGAALQEKLVSECATYKLCHPEELVLLGHSLGIPWAPLSSCPSQALQLAGCLSQLHSGLFLYQGLLQALEGISPELGPTLDTLQLDVADFATTIWQQMEELGMAPALQPTQGAMPAFASAFQRRAGGVLVASHLQSFLEVSYRVLRHLAQP  
摘要 本發(fā)明涉及用基因工程方法生產(chǎn)紅細(xì)胞生長因子/粒細(xì)胞集落刺激因子融合蛋白。通過對紅細(xì)胞生長因子和粒細(xì)胞集落刺激因子的亞克隆和末端改造以及用聚合酶鏈反應(yīng)方法,把兩個(gè)基因通過一段多肽連接起來,使之形成表達(dá)質(zhì)粒,將其轉(zhuǎn)化進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞并得到了高效表達(dá)。該融合蛋白具有紅細(xì)胞生長因子和粒細(xì)胞集落刺激因子的雙重活性,與相同劑量的EPO和G-CSF單體相比,融合蛋白具有較高的生物活性。本發(fā)明EPO的生物活性為1×105U/mg,其G-CSF的生物活性為1×107U/mg。  
國際公布  
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