公開(公告)號(hào) | CN1149284C |
公開(公告)日 | 2004.05.12 |
申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN99111511.2 |
申請(qǐng)日期 | 1999.08.18 |
專利名稱 | 以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素;讣爸品 |
主分類號(hào) | C12N11/08 |
分類號(hào) | C12N11/08 |
分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院化工冶金研究所 |
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 叢威;劉建國(guó);歐陽(yáng)藩 |
地址 | 100080 北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號(hào) |
頒證日 | 2004.05.12 |
國(guó)際申請(qǐng) | |
進(jìn)入國(guó)家日期 | |
專利代理機(jī)構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
代理人 | 高存秀 |
國(guó)省代碼 | 北京;11 |
主權(quán)項(xiàng) | 一種以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素;福摴潭ɑ嗝顾仵;割w粒直徑為80-400μm,濕密度為1.02-1.10g/cm3;它依下列制備方法獲得:(1)微珠制備:將單體A、單體B、單體C、單體D充分混合;每100g上述混合單體,加入引發(fā)劑0.8-1.3g,致孔劑6-30ml和200#汽油0-20ml;在單體總體積3-4倍的含有1-4%wt的明膠及1%wtMg(OH)2的懸浮體系中進(jìn)行聚合反應(yīng),40℃開始緩慢升溫,升溫速率為0.45-0.65℃/min,65-70℃聚合5小時(shí),70℃以上同化6-10小時(shí),過(guò)篩,用大量的水洗滌,然后用丙酮浸泡,洗去致孔劑,得到多孔型微珠;(2)表面改性:將上述微珠風(fēng)干,加入過(guò)量的含3-5%wtNaOH的甲醇溶液,18-25℃反應(yīng)24-48小時(shí)后,抽濾,用丙酮洗滌三次,即制得固定化酶用的載體;(3)載體活化:根據(jù)活化試劑的種類采用不同的活化工藝條件;(4)掛酶:按每0.2-0.4g載體,以載體濕重計(jì)算,加入800單位的青霉素;该敢旱谋壤,于19-22℃反應(yīng)36小時(shí)后再加入等量的青霉素酰化酶,繼續(xù)反應(yīng)12-24小時(shí)后停止;產(chǎn)物依次以24%wt的(NH4)2SO4或0.5M的NaCl溶液和pH8.0的磷酸緩沖液洗滌,得到以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素酰化酶。 |
摘要 | 本發(fā)明涉及一種以多元共聚多孔微珠為載體的固定化青霉素;讣爸品ā1景l(fā)明用懸浮聚合法制出多元共聚多孔微珠,經(jīng)過(guò)表面改性和活化,將青霉素酰化酶結(jié)合上去而制成。本發(fā)明制備的固定化青霉素酰化酶顆粒直徑為80-400μm,濕密度為1.02-1.10g/cm3;強(qiáng)度高,不易染菌,適合于反應(yīng)器操作;其活性比用瓊脂糖6B微珠制備的固定化酶活性高5-10倍,比用Eupergit C制備的固定化酶活性高2-3倍,綜合性能優(yōu)于已有的產(chǎn)品;成本低,制備方法簡(jiǎn)單,適于工業(yè)生產(chǎn)。 |
國(guó)際公布 |