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釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的溶液及方法

公開(公告)號(hào) CN1120239C  
公開(公告)日 2003.09.03  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN99116930.1  
申請(qǐng)日期 1999.09.30  
專利名稱 釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的溶液及方法  
主分類號(hào) C12N9/82  
分類號(hào) C12N9/82;//(C12N9/82:C12R1:19)  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海交通大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 趙鳳生  
地址 200030上海市華山路1954號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海交達(dá)專利事務(wù)所  
代理人 王錫麟;馬偉敏  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的方法,其特征在于將大腸桿菌培養(yǎng)液離心沉淀或過濾,除去液體,得到細(xì)胞,用水和磷酸鹽、Triton類表面活性劑配制成溶液,將大腸桿菌細(xì)胞加入到溶液中,置于攪拌釜中攪拌,或置于搖瓶中振搖一段時(shí)間,酶即從細(xì)胞內(nèi)釋放到液體中,再經(jīng)離心沉淀或過濾,除去細(xì)胞,溶液中的酶用于進(jìn)一步純化,操作溫度為4-37℃,酶釋放時(shí)間4-20小時(shí)。  
摘要 一種釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的溶液及方法屬于生物化學(xué)類領(lǐng)域。將大腸桿菌培養(yǎng)液離心沉淀或過濾,除去液體,得到細(xì)胞,用水和磷酸鹽、Triton類表面活性劑配制成溶液,將大腸桿菌細(xì)胞加入到溶液中,攪拌或振搖一段時(shí)間,酶即從細(xì)胞內(nèi)釋放到液體中,再經(jīng)離心沉淀或過濾,除去細(xì)胞,溶液中的酶用于進(jìn)一步純化,操作溫度為4-37℃,酶釋放時(shí)間4-20小時(shí)。溶液配制為磷酸鹽10%-15%,Triton類表面活性劑1%-45%,其余為水,所述的磷酸鹽為含有鉀鹽或鈉的正鹽或酸式鹽。本發(fā)明降低原料成本45%。酶釋放率在60%以上。優(yōu)化條件下的釋放率可達(dá)70%-80%。對(duì)純度要求不高,用過的磷酸鹽可以回收再次使用。  
國(guó)際公布  
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