公開(公告)號(hào)
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CN1120239C
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公開(公告)日
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2003.09.03
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN99116930.1
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申請(qǐng)日期
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1999.09.30
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專利名稱
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釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的溶液及方法
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主分類號(hào)
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C12N9/82
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分類號(hào)
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C12N9/82;//(C12N9/82:C12R1:19)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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上海交通大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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趙鳳生
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地址
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200030上海市華山路1954號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海交達(dá)專利事務(wù)所
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代理人
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王錫麟;馬偉敏
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的方法,其特征在于將大腸桿菌培養(yǎng)液離心沉淀或過濾,除去液體,得到細(xì)胞,用水和磷酸鹽、Triton類表面活性劑配制成溶液,將大腸桿菌細(xì)胞加入到溶液中,置于攪拌釜中攪拌,或置于搖瓶中振搖一段時(shí)間,酶即從細(xì)胞內(nèi)釋放到液體中,再經(jīng)離心沉淀或過濾,除去細(xì)胞,溶液中的酶用于進(jìn)一步純化,操作溫度為4-37℃,酶釋放時(shí)間4-20小時(shí)。
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摘要
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一種釋放細(xì)胞內(nèi)的L-天門冬酰胺酶的溶液及方法屬于生物化學(xué)類領(lǐng)域。將大腸桿菌培養(yǎng)液離心沉淀或過濾,除去液體,得到細(xì)胞,用水和磷酸鹽、Triton類表面活性劑配制成溶液,將大腸桿菌細(xì)胞加入到溶液中,攪拌或振搖一段時(shí)間,酶即從細(xì)胞內(nèi)釋放到液體中,再經(jīng)離心沉淀或過濾,除去細(xì)胞,溶液中的酶用于進(jìn)一步純化,操作溫度為4-37℃,酶釋放時(shí)間4-20小時(shí)。溶液配制為磷酸鹽10%-15%,Triton類表面活性劑1%-45%,其余為水,所述的磷酸鹽為含有鉀鹽或鈉的正鹽或酸式鹽。本發(fā)明降低原料成本45%。酶釋放率在60%以上。優(yōu)化條件下的釋放率可達(dá)70%-80%。對(duì)純度要求不高,用過的磷酸鹽可以回收再次使用。
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國(guó)際公布
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