基因芯片聯(lián)合處理系統(tǒng)及相關(guān)技術(shù)
公開(公告)號
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CN1492051A
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公開(公告)日
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2004.04.28
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申請(專利)號
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CN01142653.5
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申請日期
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2002.10.04
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專利名稱
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基因芯片聯(lián)合處理系統(tǒng)及相關(guān)技術(shù)
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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宋克
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發(fā)明(設(shè)計)人
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宋克
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地址
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201824上海市豐莊路301弄69號301室
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項
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一種基因芯片雜交信號放大標(biāo)記技術(shù),它是在基因芯片經(jīng)過雜交過程之后,利用化合物(I)作為互補(bǔ)配對的核酸雜交雙鏈特異性探針分子,而利用化合物(II)作為聚苯乙烯熒光微球?qū)B接有探針分子的雜交雙鏈核酸進(jìn)行標(biāo)記,化合物(I)結(jié)構(gòu)特征為:補(bǔ)骨脂素-L1-A,化合物(II)結(jié)構(gòu)特征為:FB(-L2-A’)n,其中,A-和A’-是指任何一對具有某種化學(xué)反應(yīng)或相互作用特異性探針分子接頭,它們可以是下列情況之一:(1)巰基和馬來酰亞胺基;(2)生物素和抗生物素蛋白,-L1-為PEO,-L2-表示水溶性連接臂,F(xiàn)B表示聚苯乙烯熒光微球,其表面修飾有可以與化合物(I)中的探針分子接頭A-特異性反應(yīng)的功能團(tuán)或作用對A’-,利用化合物(I)處理基因芯片上雜交雙鏈核酸的方法特征為:在雜交過程完成后,在-50~100攝氏度的溫度條件下將含有化合物(I)濃度為0.001mM~10M的溶液導(dǎo)入基因芯片雜交室2中持續(xù)時間為20個小時以內(nèi),在紫外光照下發(fā)生該化合物在核酸雙鏈中的鏈間共價交聯(lián)反應(yīng),從而實現(xiàn)其與雙鏈核酸的特異性共價連接,利用化合物(II)進(jìn)行信號標(biāo)記的方法特征為:在化合物(I)與雙鏈核酸實現(xiàn)共價連接之后,導(dǎo)入含有化合物(II)的溶液,持續(xù)1~100000秒時間,然后對非特異性吸附進(jìn)行洗脫。
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摘要
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本發(fā)明屬于基因芯片應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及到基因芯片的雜交,標(biāo)記,洗脫,信號檢測及數(shù)據(jù)分析技術(shù)。本發(fā)明提供一整套通過聚苯乙烯熒光微球、補(bǔ)骨脂素進(jìn)行的基因芯片雜交信號的特異性放大標(biāo)記技術(shù),該技術(shù)可以將基因芯片上的雜交信號擴(kuò)大幾個數(shù)量級以上,從而將雜交核酸的檢測能力提升到單分子水平。本發(fā)明還提供了一種提高上述各反應(yīng)過程中溶液和分子運動操縱效率的泳滲離子及溶液體系操縱技術(shù)以及用于高效屏蔽背景光或激發(fā)光噪音的表面等離子體共振激發(fā)技術(shù)。作為這些技術(shù)的一種最佳應(yīng)用的組合——基因芯片聯(lián)合處理系統(tǒng)有自動實現(xiàn)各反應(yīng)過程的HCL儀、HCL試劑盒19、基因芯片雜交室2和SPR-CCD信號檢測及數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等幾部分。其優(yōu)勢在于系統(tǒng)及其運行成本都很低、過程聯(lián)合處理能力較高,操作簡易,因而為基因芯片在臨床診斷、工商及環(huán)境檢疫、制藥和國防等領(lǐng)域的普及應(yīng)用提供了可行的技術(shù)條件。
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國際公布
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