公開(公告)號
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CN1146666C
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公開(公告)日
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2004.04.21
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申請(專利)號
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CN98810394.X
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申請日期
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1998.10.20
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專利名稱
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同源重組中的正負篩選
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主分類號
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C12N15/90
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分類號
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C12N15/90;C12N15/65;C12N15/82
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1997.10.20 EP 97118175.5
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申請(專利權(quán))人
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羅切診斷學有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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J·奧爾;R·斯賓杰;K·霍諾德
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地址
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德國曼海姆
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頒證日
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2004.04.21
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國際申請
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PCT/EP1998/006616 1998.10.20
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進入國家日期
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2000.04.20
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專利代理機構(gòu)
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中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務(wù)所
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代理人
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樊衛(wèi)民
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國省代碼
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德國;DE
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主權(quán)項
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一種通過同源重組將異源DNA導(dǎo)入宿主細胞的方法,其中宿主細胞用含有兩個側(cè)翼核苷酸序列的重組載體轉(zhuǎn)染,所述側(cè)翼核苷酸序列與宿主細胞基因組中的目標序列同源,且編碼正選擇標記的核苷酸位于兩個側(cè)翼核苷酸序列內(nèi)側(cè),編碼負選擇標記的核苷酸序列位于兩個側(cè)翼核苷酸序列外側(cè),選擇標記基因與在宿主細胞中有活性的表達控制序列有效連接,其中使用一種或多種編碼位于細胞表面多肽的核苷酸序列作為負選擇標記,使得在載體通過同源重組整合入細胞基因組后負選擇基因不表達,在載體通過隨機整合入細胞基因組后負選擇基因表達,且其基因產(chǎn)物出現(xiàn)在細胞表面。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種通過同源重組向目標細胞基因組中導(dǎo)入異源DNA的方法。本發(fā)明還涉及適于同源重組的DNA構(gòu)建體。
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國際公布
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WO99/20780 德 1999.4.29
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