| 公開(公告)號 | CN1439424A |
| 公開(公告)日 | 2003.09.03 |
| 申請(專利)號 | CN03108006.5 |
| 申請日期 | 2003.04.30 |
| 專利名稱 | 抗非典病毒轉移因子的制備方法 |
| 主分類號 | A61K38/02 |
| 分類號 | A61K38/02;A61K35/26;A61K35/28;A61K39/215;A61P31/14;C07K14/495;C07K14/435 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設計)人 | 許東亮;張國成 |
| 地址 | 710032陜西省西安市長樂西路15號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 西安通大專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 李鄭建 |
| 國省代碼 | 陜西;61 |
| 主權項 | 抗非典病毒轉移因子制備方法，其特征在于，包括以下步驟：1)制備非典病毒抗原將從病人呼吸道分泌物中分離獲得的非典病毒，接種于已長成單層的Hep-2細胞、人胚腎細胞、人胚肺細胞或雞胚，37℃孵育，每天觀察細胞病變情況，當CPE出現(xiàn)+++時或經病毒抗原檢測陽性；收集細胞及上清，經病毒滅活后超聲打碎，放冰箱冰凍保存；或按非典病毒基因序列用基因工程方法表達制備保護性抗原；2)以蔗糖沉層濃縮，以不連續(xù)梯度密度離心純化病毒抗原將超聲打碎的抗原5000rpm離心20min，棄去沉渣留上清，裝入以15％、30％、45％及60％的蔗糖制備的不連續(xù)梯度密度離心管，超速離心，165000×g、3h，根據(jù)病毒的分子量確定該病毒所在離心管位置，吸出冰凍保存?zhèn)溆谩?)用所提取的病毒抗原免疫動物挑選健康哺乳動物，取上述制備的病毒抗原免疫動物，共免疫5～6次，前兩次分別以完全佛氏佐劑及不完全佛氏佐劑混合抗原，以高速組織勻漿機打勻，在動物皮內或皮下多點注射免疫，第3次以后在動物的肌肉或靜脈注射，每次免疫間隔一周，最后一次免疫7天后取動物靜脈血，以免疫熒光方法或ELISA方法檢測上述病毒的特異性抗體效價，出現(xiàn)病毒特異性免疫效價后，宰殺動物，取脾及淋巴結節(jié)組織，低溫冰凍保存?zhèn)溆茫?)從免疫動物中提取抗非典病毒轉移因子病毒免疫的動物脾及淋巴結組織，去其表面的筋膜、脂肪等組織，滅菌生理鹽水反復沖洗，剪碎，經組織勻漿機高速粉碎，反復凍融4～6次，每次融化后均再以組織勻漿機高速勻漿粉碎，然后以超濾或透析的方法提取抗非典病毒轉移因子。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種抗非典病毒轉移因子制備方法，首先，非典病毒經Hep-2細胞、人胚腎細胞、人胚肺細胞或雞胚培養(yǎng)增殖，制備非典病毒抗原以及根據(jù)非典病毒的基因序列用基因工程方法表達制備的保護性抗原。其次，以不連續(xù)梯度密度離心純化病毒抗原，或以20％蔗糖沉層濃縮抗原。然后，用所提取的病毒抗原免疫動物。最后，從免疫動物中提取抗非典病毒轉移因子。本發(fā)明的抗非典病毒轉移因子藥物通過增強呼吸道的免疫殺傷細胞特異性殺傷功能及調節(jié)粘膜免疫機制，能夠起到預防及治療上述病毒感染的作用，可以制備成注射液或滴鼻液藥物，具有既可預防，又可治療，標本兼治的特點。 |
| 國際公布 |
