公開(公告)號
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CN1301723C
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公開(公告)日
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2007.02.28
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申請(專利)號
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CN200510042532.2
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申請日期
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2005.03.03
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專利名稱
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一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法
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主分類號
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A61K36/48(2006.01)I
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分類號
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A61K36/48(2006.01)I;A61K38/56(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K131/00(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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山東大學
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發(fā)明(設計)人
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趙小凡;王金星
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地址
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250100山東省濟南市歷下區(qū)山大南路27號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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濟南圣達專利商標事務所
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代理人
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鄭華清
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國省代碼
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山東;37
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主權(quán)項
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一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法,包括如下步驟:(1)取大豆或豆粕研磨成粉,使其顆粒直徑為10μm~50μm,(2)溶入緩沖液中攪拌15小時~24小時,過濾去除沉淀,上清液經(jīng)8,000rpm~14,000rpm離心8min~15min,50%硫酸銨沉淀,(3)將上述沉淀溶解在剛浸沒量的緩沖液中,于10倍體積的緩沖液中透析18小時~24小時,(4)透析后的溶液經(jīng)8,000rpm~14,000rpm離心8min~15min,(5)將步驟(4)的上清液緩慢加到用緩沖液平衡過的排阻層析柱上,用緩沖液分離并分部收集其中有抑制活性的部分,(6)將所述收集液緩慢加到用緩沖液平衡過的離子交換柱上,先用200ml緩沖液洗滌柱子以去除未結(jié)合的蛋白質(zhì),再用100ml緩沖液對100ml 0.5mol/L NaCl溶液作梯度洗脫,分部收集,得到組織蛋白酶B抑制因子。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法,包括大豆或豆粕研磨、攪拌、沉淀、透析、排阻層析柱、離子交換柱分離、洗脫、分部收集等步驟;利用本發(fā)明的方法純化制備的大豆組織蛋白酶B抑制因子對人宮頸癌細胞(Hela)和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(glioma)生長有顯著抑制效果,為一步研究開發(fā)成為抗腫瘤藥物或腫瘤預防藥物或相關(guān)保健預防食品以及大豆產(chǎn)品精加工和原料的綜合利用提供了新的途徑。
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國際公布
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