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一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法

公開(公告)號 CN1301723C  
公開(公告)日 2007.02.28  
申請(專利)號 CN200510042532.2  
申請日期 2005.03.03  
專利名稱 一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法  
主分類號 A61K36/48(2006.01)I  
分類號 A61K36/48(2006.01)I;A61K38/56(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;A61K131/00(2006.01)N  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 山東大學  
發(fā)明(設計)人 趙小凡;王金星  
地址 250100山東省濟南市歷下區(qū)山大南路27號  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構(gòu) 濟南圣達專利商標事務所  
代理人 鄭華清  
國省代碼 山東;37  
主權(quán)項 一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法,包括如下步驟:(1)取大豆或豆粕研磨成粉,使其顆粒直徑為10μm~50μm,(2)溶入緩沖液中攪拌15小時~24小時,過濾去除沉淀,上清液經(jīng)8,000rpm~14,000rpm離心8min~15min,50%硫酸銨沉淀,(3)將上述沉淀溶解在剛浸沒量的緩沖液中,于10倍體積的緩沖液中透析18小時~24小時,(4)透析后的溶液經(jīng)8,000rpm~14,000rpm離心8min~15min,(5)將步驟(4)的上清液緩慢加到用緩沖液平衡過的排阻層析柱上,用緩沖液分離并分部收集其中有抑制活性的部分,(6)將所述收集液緩慢加到用緩沖液平衡過的離子交換柱上,先用200ml緩沖液洗滌柱子以去除未結(jié)合的蛋白質(zhì),再用100ml緩沖液對100ml 0.5mol/L NaCl溶液作梯度洗脫,分部收集,得到組織蛋白酶B抑制因子。  
摘要 本發(fā)明公開了一種從大豆或豆粕中純化制備抗腫瘤因子-組織蛋白酶B抑制因子的方法,包括大豆或豆粕研磨、攪拌、沉淀、透析、排阻層析柱、離子交換柱分離、洗脫、分部收集等步驟;利用本發(fā)明的方法純化制備的大豆組織蛋白酶B抑制因子對人宮頸癌細胞(Hela)和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞(glioma)生長有顯著抑制效果,為一步研究開發(fā)成為抗腫瘤藥物或腫瘤預防藥物或相關(guān)保健預防食品以及大豆產(chǎn)品精加工和原料的綜合利用提供了新的途徑。  
國際公布  
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