| 公開(公告)號 | CN101062413A |
| 公開(公告)日 | 2007.10.31 |
| 申請(專利)號 | CN200710040471.5 |
| 申請日期 | 2007.05.10 |
| 專利名稱 | 抗犬細(xì)小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法 |
| 主分類號 | A61K39/395(2006.01)I |
| 分類號 | A61K39/395(2006.01)I;C07K16/08(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海交通大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 劉永德;唐 峰;葉陳梁;汪 毅 |
| 地址 | 200240上海市閔行區(qū)東川路800號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 上海交達(dá)專利事務(wù)所 |
| 代理人 | 王錫麟;張宗明 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種抗犬細(xì)小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟一，采集診斷為細(xì)小病毒感染的病死犬的腸道及內(nèi)容物按重量比1∶1加生理鹽水研磨，離心去除沉渣，上清液離心去除微小顆粒； 步驟二，在去除微小顆粒后的上清液中加入氯仿，劇烈振蕩，離心去除脂溶性物質(zhì)； 步驟三，取去除脂溶性物質(zhì)后的上清液，加入醛化、洗滌后的豬紅細(xì)胞，搖勻放置進(jìn)行病毒吸附，離心沉淀豬紅細(xì)胞，加入高滲鹽水后放置進(jìn)行病毒釋放，離心去除豬紅細(xì)胞，取病毒釋放液，測HA效價，達(dá)1∶4096有效； 步驟四，取上述病毒釋放液經(jīng)甲醛滅活后加入褐藻多糖，制備成油乳劑犬細(xì)小病毒疫苗，將制備的犬細(xì)小病毒疫苗免疫20周齡以上經(jīng)產(chǎn)母雞，用血凝抑制試驗進(jìn)行效價測定，當(dāng)卵黃中HI效價達(dá)1∶256以上時收集免疫卵，效價低于1∶128時進(jìn)行第三次免疫； 步驟五，收獲卵黃用無菌蒸餾水對倍稀釋，用乳酸液進(jìn)行酸處理去除雜蛋白、凍融去脂，抽濾液經(jīng)硫酸銨鹽析提取IgY，除鹽后稀釋封裝安培瓶中，放水浴箱處理，經(jīng)口服安全性檢驗及微生物檢驗合格后即成口服生物制劑。 |
| 摘要 | 一種抗犬細(xì)小病毒卵黃抗體生物制劑的制備方法，采集診斷為細(xì)小病毒感染的病死犬病料，離心去除沉渣，上清液離心，取上清液加入氯仿，劇烈振蕩，離心取上清液加入醛化洗滌后的豬紅細(xì)胞，搖勻放置，離心取沉淀，加入鹽水后放置，離心取病毒釋放液測HA效價，達(dá)1：4096有效；取上述病毒釋放液經(jīng)甲醛滅活后加入褐藻多糖制備成油乳劑犬細(xì)小病毒疫苗，將該疫苗免疫經(jīng)產(chǎn)母雞后用血凝抑制試驗測定免疫卵HI效價，達(dá)標(biāo)后收獲卵黃用無菌蒸餾水對倍稀釋，用乳酸液進(jìn)行酸處理去除雜蛋白、凍融去脂，抽濾液進(jìn)行鹽析，除鹽后調(diào)整IgY的濃度分裝，放水浴箱處理，即成口服生物制劑，其IgY的得率達(dá)95％以上，活性不受任何影響，一個免疫卵一般可得IgY 70-100mg。 |
| 國際公布 |
