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白眉蝮蛇去整合素定點(diǎn)突變體cDNA的克隆、表達(dá)及其蛋白質(zhì)制法與應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN101113448A  
公開(公告)日 2008.01.30  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200710011961.2  
申請(qǐng)日期 2007.07.03  
專利名稱 白眉蝮蛇去整合素定點(diǎn)突變體cDNA的克隆、表達(dá)及其蛋白質(zhì)制法與應(yīng)用  
主分類號(hào) C12N15/12(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/12(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 趙寶昌  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 趙寶昌  
地址 116023遼寧省大連市沙河口區(qū)揚(yáng)州街69-203  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 大連科技專利代理有限責(zé)任公司  
代理人 于忠晶  
國省代碼 遼寧;21  
主權(quán)項(xiàng) 白眉蝮蛇去整合素的定點(diǎn)突變體cDNA序列,其特征是:將白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突變成C145、C146和A148,得cDNA含219個(gè)堿基對(duì),核苷酸序列為: GAGGCCGGAG AAGAATGTGA CTGTGGCTCT CCTGGAAATC CGTGCTGTGA 50 TGCTGCAACC TGTAAACTGA GACAAGGAGC ACAGTGTGCA GAAGGACTGT 100 GTTGTGACCA GTGCAGATTT ATGAAAAAAG GAACAGTATG CCGGCCAACA 150 AGGGGTGATG ACATGGATGA TTACTGCAAT GGCATATCTG CTGGCTGTCC 200 CAGAAATCCC TTCCATGCC 219。  
摘要 本發(fā)明涉及生物領(lǐng)域。白眉蝮蛇去整合素定點(diǎn)突變體cDNA的克隆、表達(dá)及其蛋白質(zhì)制法與應(yīng)用,白眉蝮蛇蛇毒突變體蛋白質(zhì)的cDNA序列將白眉蝮蛇去整合素cDNA序列中A145、T146、G148突變成C145、C146和A148,得cDNA含219個(gè)堿基對(duì),與相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列及在大腸桿菌和畢赤酵母中的表達(dá),制備方法簡單易操作,從白眉蝮蛇毒腺中分離提取出總RNA,利用RT-PCR的方法反轉(zhuǎn)錄出總cDNA,對(duì)其進(jìn)行定點(diǎn)突變得到一條長度為219bp的多核苷酸序列。還提供一個(gè)大腸桿菌BL21和畢赤酵母菌中成功表達(dá)的分子量約為8000的小分子量蛋白質(zhì)。此蛋白質(zhì)具有顯著的抗血管生成作用,而無抑制血小板聚集作用。其在抗腫瘤的藥物中的應(yīng)用,具有較高的安全性及較低的副作用,具有更高的應(yīng)用價(jià)值。  
國際公布  
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