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銀杏愈傷組織或懸浮細胞的快速繁殖方法

公開(公告)號 CN101130763A  
公開(公告)日 2008.02.27  
申請(專利)號 CN200710143210.6  
申請日期 2007.08.08  
專利名稱 銀杏愈傷組織或懸浮細胞的快速繁殖方法  
主分類號 C12N5/04(2006.01)I  
分類號 C12N5/04(2006.01)I  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權  
申請(專利權)人 南京林業(yè)大學  
發(fā)明(設計)人 曹福亮;陳 穎;胡春宏  
地址 210037江蘇省南京龍蟠路159號南京林業(yè)大學環(huán)境學院  
頒證日  
國際申請  
進入國家日期  
專利代理機構 北京元本知識產(chǎn)權代理事務所  
代理人 葉 凡  
國省代碼 江蘇;32  
主權項 一種銀杏愈傷組織或銀杏懸浮細胞的快速繁殖方法,包括無菌葉源的獲得、愈傷組織誘導及繼代培養(yǎng)、懸浮細胞培養(yǎng)等步驟,其主要步驟如下: (1)、按照常規(guī)植物組織培養(yǎng)的芽或葉片增殖的方法,獲得無菌的銀杏芽苗或葉片; (2)、將步驟(1)所獲得的銀杏無菌芽苗或葉片接種到愈傷組織誘導培養(yǎng)基中進行愈傷組織誘導培養(yǎng),初代培養(yǎng)后連續(xù)繼代5~6次,獲得松散的銀杏愈傷組織; (3)、將步驟(2)所獲得的銀杏愈傷組織接種在含有NAA和KT的MS液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng),繼代培養(yǎng)2次,得液體懸浮培養(yǎng)細胞; (4)、將步驟(3)所得到的液體懸浮培養(yǎng)細胞接種在下述任意一種液體培養(yǎng)基中進行振蕩培養(yǎng):(a)MS液體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+稀土0.5~5mg/L,或(b)MS液體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+水楊酸0.5~5mg/L;收集細胞培養(yǎng)物,得銀杏懸浮細胞;或將步驟(2)中所獲得的銀杏愈傷組織繼代在下述任意一種固體培養(yǎng)基上培養(yǎng):(a)MS固體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+稀土0.5~5mg/L,或(b)MS固體培養(yǎng)基+NAA1.0mg/L+KT0.5mg/L+水楊酸0.5~5mg/L,收獲愈傷組織培養(yǎng)物,得銀杏愈傷組織。  
摘要 本發(fā)明公開了一種銀杏愈傷組織或懸浮細胞的快速繁殖方法,包括無菌葉源的獲得、愈傷組織誘導及繼代培養(yǎng)、懸浮細胞培養(yǎng)、愈傷組織或懸浮細胞中產(chǎn)生黃酮類化合物等步驟,本發(fā)明方法所制備的銀杏愈傷組織或懸浮細胞中有較高含量的銀杏黃酮類化合物。本發(fā)明方法利用稀土、水楊酸等誘導子對銀杏愈傷組織或懸浮細胞的培養(yǎng)和黃酮的生產(chǎn)進行有目的的調控,可以在短期內獲得大量的制藥原料,并能有效降低生產(chǎn)成本。  
國際公布  
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