請問診斷雞傳染性法氏囊病時如何進行瓊脂擴散試驗?
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瓊脂凝擴散實驗主要包括以下幾個要點:①抗原的制 備:取病雞典型病變的法氏囊,研磨成懸液后,凍融3次,10 000轉(zhuǎn)/分鐘離心 30分鐘收集上清液,用0.15%的福爾馬林滅活,測定抗原的效價,然后將抗原 按一定的稀釋倍數(shù)進行稀釋后,分別與一定稀釋倍數(shù)的陽性血清進行試驗,血清 全部出現(xiàn)陽性反應(yīng)時認為抗原合格。②瓊脂凝平板的制備:配置1%的瓊脂凝倒 人平板,用打孔器打成7孔
梅花樣,其孔間距為3毫米,孔徑為3毫米。③加樣 及結(jié)果判定:中間孔放入已知的抗原,周圍孔加入待檢測的血清、陽性血清和陰 性血清,放于37°C溫箱中,保持一定的濕度,經(jīng)過24小時、48小時、72小時 觀察反應(yīng)結(jié)果,只要有沉淀線出現(xiàn)便可以判定為陽性反應(yīng),不出現(xiàn)沉淀線的為陰 性反應(yīng)。如果在瓊脂凝膠中加入3%的PEG,能提髙檢出率。
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