口蹄疫防治技術(shù)之實驗室診斷
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口蹄疫（Foot and Mouth Disease ，F(xiàn)MD)是由口蹄疫病毒（FMDV)引起的偶蹄動物的急性、熱性、高度接觸性、烈性傳染病，其臨床表現(xiàn)以口腔粘膜、舌面、鼻鏡、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和潰爛為特征。從這些表面特征就可以基本上判斷出這種病，但是要確診還必須通過實驗室診斷�？谔阋卟《揪哂卸嘈托�，故口蹄疫實驗室診斷不僅要確定病性，而且要鑒定病毒型。應(yīng)無菌操作采取病毒的水皰皮、水皰液或
發(fā)熱時的血液或者恢復(fù)期血清，專人送往有關(guān)檢驗部門檢驗。 一． 血清學(xué)診斷方法 血清學(xué)診斷方法在FMD的監(jiān)測方面十分有效，包括補(bǔ)體結(jié)合試驗、中和試驗、凝集試驗、免疫擴(kuò)散試驗、沉淀試驗、免疫電泳、免疫熒光和放射免疫等技術(shù)。目前被廣泛應(yīng)用的有瓊脂擴(kuò)散試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗、中和試驗、間接血凝試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗。 (1) 瓊脂擴(kuò)散試驗 該方法既可以檢測病毒抗原，也可以檢測抗體。在瓊脂中FMDV抗原和標(biāo)準(zhǔn)陽性血清或未知的被檢血清之間形成免疫沉淀線，并能在48h之內(nèi)提供結(jié)果。長期以來，該試驗主要用于血清樣品中FMDV的檢測。 (2) 補(bǔ)體結(jié)合試驗(CFT) CFT既可鑒定抗原，又可鑒定抗體，并可定量。但CFT方法相對不夠敏感，且有易解釋樣品的親補(bǔ)體活性和抗補(bǔ)體活性。 (3) 病毒中和試驗(VNT) 病毒中和試驗是利用血清中和抗體與病毒特異性的結(jié)合作用，使病毒失去吸附細(xì)胞的能力或抑制其侵入和脫衣殼，喪失對易感動物和敏感細(xì)胞的感染力。 （4)口蹄疫反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR) 用于檢測疑似感染動物水皰皮或水皰液中所有血清型口蹄疫病毒，適用于口蹄疫病毒的檢測、診斷和
流行病學(xué)調(diào)查。 二． 口蹄疫液相阻斷ELISA診斷試劑盒 1． O型口蹄疫液相阻斷ELISA診斷試劑盒 液相阻斷ELISA是國際獸疫局（OIE)推薦的檢測口蹄疫病毒抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法。用分離于我國的口蹄疫O型毒株研制出液相阻斷ELISA試劑盒，用于測定牛、豬、
羊血清中針對O型口蹄疫病毒結(jié)構(gòu)蛋白的抗體。本試劑盒主要用途，一是對進(jìn)出口動物口蹄疫病毒抗體監(jiān)測；二是監(jiān)測口蹄疫疫苗免疫抗體，以評價動物群體抗感染能力。 2、口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試劑盒（3ABC-I-ELISA)本試劑盒適用于活畜進(jìn)出口調(diào)運(yùn)、疫區(qū)凈化檢疫和群體無癥狀感染評價，檢測活畜血清中口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體，以區(qū)分感染和免疫動物。 三． 對口蹄疫和豬水泡病間接血凝診斷的正確使用。 豬口蹄疫與豬水泡病不好區(qū)別，在鑒別診斷上要重點(diǎn)做好這兩個病，采用反向間接血凝診斷實驗可以有很好的效果。 在實際生產(chǎn)中，為了監(jiān)測口蹄疫抗體的效價，為了預(yù)防口蹄疫，為了鑒別口蹄疫，為了確診口蹄疫，采用實驗室檢測的手段都是很要必要的！
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使用ELISA診斷試劑盒
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實驗室檢測診斷
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